如何改善强水溶性化合物的保留跟分离.ppt

幻灯片制作：WSY18 如何改善强水溶性化合物的保留和分离 奥秘科技/AUMI Technologies （US） 改进水溶性化合物的保留和分离 使用极性反相色谱柱，高水相流动相；调整pH值抑制分析物的离子化。 使用离子对试剂，选择低比表面、短链键合相 使用HILIC分离技术 使用离子交换/反相混合固定相 2，-0-甲基-腺嘌呤核苷HPLC方法 RT样品峰=18.902min RT主杂质峰=21.024min 主峰与后杂峰 （RT=20.634min）的分离度R=7.81, 主峰后杂峰（RT=20.634min）与主要杂质的分离度R=1.70 色谱柱：Aumi Baulo C18 5um 100? 4.6*250mm; 波 长：260nm; 柱 温：30℃; 流 速：1.0mL/min 流动相：流动相A：0.63g甲酸铵溶解于900ml水中，并用甲酸调PH=3.00，再加水使溶液为1L,过滤即得； 流动相B：乙腈 样 品：流动相A溶解，待分离样品1mg/mL；进 样：5ul 梯度表： 时间（min） A(%) B(%) 0 100 0 20 90 10 35 90 10 35 100 0 45 100 0 阿奇霉素有关物质检测 空白 药典方法 样品，100%水 次黄嘌呤有关物质分析 色谱柱：Aumi Baulo C18 5um 100? 4.6*250mm 流动相：0.1%磷酸氢二钠溶液（磷酸调节pH值至7.50） 流 速：1.0ml/min 柱 温：室温 波 长：254nm 样 品：样品2.0mg/ml（水溶解），对照品0.2408mg/ml（客户原液） 进 样：5ul Venusil HILIC (丙酰胺键合相） 键合相，原理和目的 丙酰胺键合硅胶 已腈／水流动相中主要依靠氢键合和电子极化作用，对于多羟基，多氨基，酰胺类和有机酸有很好的保留和分离 在弱极性流动相中，对于极性化合物的保留与ＮＨ２相似或略低，有利于极性化合物的洗脱 水溶液中稳定性明显优于氨基柱或纯硅胶柱 正相条件下与氨基柱比较 Test in Traditional Normal Phase Mode Columns: 5um, 4.6 x 150 mm Mobile phase: Chloroethane/methanol/water=91.8:8:0.2 Sample: Toluene, Nitrobenzene, 4- Bromoaniline acetate, 3-nitroaniline Unisol Amide less polar Venusil NH2 ＨＩＬＩＣ　分离模式 N-aceto uracil uracil Column: Venusil Silica, 5um, 4.6 x150 mm Mobile Phase: 10 mmol sodium phosphate(pH7.0)/ACN= 35/65 Temperature: ambient Detection: UV 254 nm ＨＩＬＩＣ分离模式 N-aceto uracil uracil Column: Venusil HILIC, 5um, 4.6 x150 mm Mobile Phase: 10 mmol sodium phosphate(pH7.0)/ACN= 35/65 Temperature: ambient Detection: UV 254 nm Venusil HILIC (丙酰胺固定相） N-aceto uracil Ganciclovir Ganciclovir Column: Venusil Hilic, 5um, 4.6 x150 mm Mobile Phase: 10 mmol sodium phosphate(pH7.0)/ACN= 35/65 Temperature: ambient Detection: UV 254 nm 水溶性维生素分离 Time Samples: VB1, VB6, VC, VB2 HPLC Conditions Column: Venusil HILIC 4.6 x 150 mm, 5um Mobile Phase：0.1%TFA:ACN = 90:10 Det: 280nm; Flow: 1.0mL/min; Temp: 30℃； Inj: 2 μL ＶｅｎｕｓｉｌＨＩＬＩＣ Column, 5μm, 4.6mm×150mm Part No.: ＶＨ951505-0 Brand