原核基因表达调控课件.pptVIP

第七章 原核基因表达调控;一、基因表达的概念;二、基因表达的方式;（二）适应型表达(adaptive expression);负控诱导;法国巴斯德研究所Jacob和Monod等人1961年提出 (lac operon)学说，1965年获诺贝尔医学与生理学奖 ;（一）阻遏蛋白的负调控（负控诱导）;结构基因：操纵子中被调控的编 码蛋白质的基因 一个操纵子中含有2个以上的结构基因，每个结构基因是一个连续的开放阅读框，各结构基因头尾衔接、串连排列，组成结构基因群。转录成多顺反子mRNA，核糖体在合成完第一个编码的多肽后不脱离mRNA而继续翻译合成下一个基因编码的多肽，直至合成完这条多顺反子mRNA所编码的全部多肽。;lacZ：;乳糖操纵子的组成 ;乳糖操纵子的负调控（I）;乳糖操纵子的负调控（II）;1，Z、Y、A基因的产物由同一条多顺反子的mRNA分子所编码。 2， 该mRNA分子的启动子（P）位于阻遏基因（I）与操纵区（O）之间，不能单独起始β-半乳糖苷酶和透过酶的高效表达。 3， 操纵区是DNA上的一小段序列（仅为26bp），是阻遏物的结合位点。 4，当阻遏物与操纵区结合时，lac mRNA的转录起始受到抑制。 5，诱导物通过与阻遏物结合，改变它的三维构象，使之不能与操纵区结合，从而激发lac mRNA的合成。当有诱导物存在时，操纵区没有被阻遏物占据，所以启动子能够顺利起始mRNA的转录。;lac 操纵子的本底水平表达;葡萄糖对lac 操纵子的影响;（二）CAP的正调控;CAP以二聚体形式与DNA结合，使DNA弯曲90度;CAP在不同操纵子中的DNA结合位点;cAMP含量与葡萄糖的分解代谢有关，当细菌利用葡萄糖供给能量时，cAMP含量降低；无葡萄糖时，cAMP含量升高。 cAMP与cAMP受体蛋白CRP（ cAMP receptor protein ）结合后所形成的复合物CAP，并以二聚体的方式与特定的DNA序列结合，使转录效率提高50倍。 CAP通过改变启动子的构象以及与RNA聚合酶的相互作用,帮助酶分子正确定向,以便与-10区结合，起到取代-35区功能的作用。使转录效率提高50倍 Plac是弱启动子，单纯去阻遏使lac操纵子转录开放还不能使细菌很好利用乳糖，必需同时有CAP来加强转录活性。;四、色氨酸操纵子;（一）阻遏蛋白的负调控（负控阻遏）;（二）弱化子的调控;前导序列的转录物内部有4个配对区，彼此都能配对:1区2区配对、3区4区配对，能形成两个茎环结构。第二个茎环后紧接寡聚U。;弱化作用;自习： 半乳糖操纵子，阿拉伯糖操纵子（p255-263） ;1，转录水平上的调控（transcriptional regulation） （1）转录的起始--转录水平调控的主要部位 通过RNA聚合酶、转录因子和启动子的相互 作用实现转录调控。 （2）转录的终止 2，转录后水平上的调控（post-transcriptional regulation）;转录单元;Most bacterial promoters have –35 and –10 elements（ consensus sequences ） Some have UP element Some lack –35 element, but have extended –10 region;转录的起始—RNA聚合酶(RNA polymerase);大肠杆菌RNA聚合酶;原核生物转录起始;s 因子;s 因子功能;s70 promoters in E.coli;The 3D structure of bacterial RNA polymerase holoenzyme;启动子调节— 抑制（I）;DNA binding domain;-82;;;Anti-activation：抑制分子去除激活分子的效应;启动子调节— 激活（I）;;;转录的终止—终止子(terminator);终止序列的特点： 1）回文结构（转录的mRNA形成茎环状的发夹结构）； 2）回文结构富含G-C； 3）回文序列的下游常有 6—8个AU对 ;强终止子;弱终止子;抗终止作用(anti一termination) ρ因子的作用可以被抗终止因子所抵消，这样，RNA聚???酶便可通过终止子(依赖于ρ因子的)继续转录后面的基因。;自习： 转录后水平上的调控（p272-278）;五、细菌的应急反应;应急反应的信号： 鸟苷四磷酸（ppGpp）和鸟苷五磷酸（pppGpp）（魔斑核苷酸） 魔斑核苷酸产生的诱导物：空载tRNA 严紧控制因子（stringent factor ，SF）：rel A基因;ppGpp与pppGpp—超级