GB/T 5413.25-1997婴幼儿配方食品和乳粉　肌醇的测定.pdf

GB/T5413.25-1997 前 言 本标准等同采用美国公职分析化学师协会(AOAC)方法，测定的是具有生物效价的肌醉含量。 本系列标准从实施之日起，代替GB5413-85, 本标准由中国轻工总会提出。 本标准由全国乳品标准化中心归口。 本标准负贵起草单位:国家乳制品质量监份检验中心。 本标准参加起草单位:卫生部食品卫生监份检验所、浙江省轻工业研究所、哈尔滨森永乳品有限公 司、雀集(中国)投资服务有限公司. 本标准主要起草人:张玉杰、王芸、房玉国、王克新。 中华人民共和 国国家标准 婴幼儿配方食 品和乳粉 Gs/T5413.25-1997 肌醇 的测定 代替GB5413-85 Milkpowderandformulafoodsforinfantandyoungcbildren -Determinationofinositol ， 范围 本标准规定了肌醇的测定方法。 本标准方法一适用于婆幼儿配方食品和乳粉中肌醇的测定，方法二适于乳粉中肌薛的测定. 方法一 徽生物法 2 方法原理 通过Saccharomycesuvaru二的生长情况来评价肌醉的含量。 3试荆、菌种和培养荃 所有试剂，如未注明规格，均指分析纯;所有实验用水，如未注明其他要求，均指三级水。 3.1盐酸:体积比为1，1 将体积分数为37%的浓盐酸SOmL用水稀释至lOOmL, 3.2氢氧化钠:c(NaOH)为lmol/L 将4鲍氢氧化钠溶解于水中，稀释至l000mL, 3.3 肌醉标样:无水晶体。 3.4 菌种 Saccharomycesuvarum, 3.5 培养基 3.5.1链泡排菌琼脂培养基:3号蛋白陈5g,酵母浸膏5g,麦芽糖40g,琼脂15g, 3.5.2肌醉测定用培养基:葡萄糖1oog,柠檬酸钾log，柠檬酸2g,磷酸二氢钾1.1g,撅化钾0.85g，硫 酸镁。.25g,抓化钙。.25g,硫酸锰50mg,盆化亚铁50mg,DL一色氨酸80mg,L-$t氨酸。.1g,L一异亮氨酸 0.5g,L-赖氮酸0.5g,L一蛋氮酸0.2g,DL一苯基丙氨酸0.2g,L-酪氨酸0.2g,L一天门冬酞胺0.8g,DL一天 门冬氮酸0.2g,DL一丝氮酸0.lg，甘氨酸。.2g,DL一苏氨酸0.4g,L-绷氨酸0.5g,L一组氨酸。.124g,L-脯 氮酸0.2g,DL一丙氨酸。.4g,L一谷氨酸。.6g,L-精氨酸0.48g,盐酸硫胺素500pg，生物素16pg,泛酸钙 5mg,盐酸毗哆醉lmg，加蒸馏水至1000mL,pH5.2士0.2(250C), 4 仪器 常用实验室仪器及: 4.1pH计。 国家技术监，局1997一05一28批准 1998一09-01实施 GB/T5413.25-1997 250mL 圆底烧瓶，与冷凝器连接的锥形玻璃接头。 :.;比色仪 5 样品制备 5.1贮备菌种的制备 5.1.1从纯菌种Suva、二中转接2个以上已制备好的麦芽浸出汁琼脂斜面。30℃培养16-24h,贮 于冰箱中，保存期不要超过2周，然后再转挤到新的琼脂斜面上。 5.1.2接种的准备 最好在使用的当天从贮备菌种中转接到新配制的麦芽浸出汁琼脂斜面上，30℃培养16^-24h。用接 种环无菌地转接该菌种到一个灭菌生理盐水中，直到得到一定浓度菌体细胞的悬浮液。为了测定，制备 一个醉母菌悬浮水溶液，这个悬浮液中酵母菌的浓度在。.lmg/mL。分光光度计事先用水调到10000透 光率，然后测定这个标“准”醉母菌的透光率。将新接种斜面中的菌体细胞移人到无菌生理盐水中，其浓 度直到达到与上述标准溶液具有相同的透光率为止。 5.2 标准溶液 5.2.1标准贮备液，肌醇的浓度为。.2mg/mL, 称取100mg肌醉(该肌醉标样已放在干燥器中干燥24h)，于容量瓶