水产ppt课件第三章_免疫学原理与应用.pptVIP

（三）放射免疫测定技术 (Radioimmunoassay, RIA) 1. 定义：用放射性同位素标记来检测抗原抗体反应的高灵敏度的技术。 2. 原理与方法：其基本原理为：待测抗原和标记抗原对有限量抗体存在竞争性结合： Ag* + Ab ? Ag*-Ab；Ag + Ab ? Ag-Ab (1) 抗原用同位素(如131I、3H等) 标记后仍能与相应抗体特异性结合； (2) 将两类抗原与抗体混合后，两类抗原均能与抗体结合，当Ag*和Ab数量恒定，且Ag*与Ag之和大于Ab上结合点数目时， Ag*与Ag 存在竞争抑制：Ag数量增加，Ab-Ab生成量增加， Ag*-Ab数量就减少，游离的Ag*就增多。 (3) 用层析等方法将Ag*-Ab和Ag-Ab复合物(B)与游离Ag*和Ag (F)分离，测定B和F的放射活性。计算B/F值，绘制B/F和Ag量的关系曲线图。 (4) 预先用一系列已知浓度的未标记抗原和一定量的标记抗原及抗体混合，以相同方法绘制B/F和Ag量的关系的标准竞争抑制曲线图。 (5) 试验时，在同样条件下，根据待测Ag的放射性结合率，依标准曲线查出Ag量。 免疫应用：免疫学方法 （四）荧光和化学发光免疫技术 A. 荧光免疫技术 1. 定义：用荧光素（如异硫氰酸荧光素、四乙基罗丹明和四甲基异硫氰酸罗丹明）标记来检测抗原抗体反应的免疫分析技术。 2