双醋瑞因对il-1β诱导软骨细胞凋亡的影响和作用机制的研究-effect of diacerein on il - 1β - induced chondrocyte apoptosis and its mechanism.docxVIP

双醋瑞因对IL-1β诱导软骨细胞凋亡的影响和作用机制的研究研究生：廖俊琳导师：刘日光教授摘要【目的】探讨双醋瑞因对体外IL-1β诱导大鼠关节软骨细胞凋亡的影响以及可能作用机制。【方法】体外培养SD大鼠关节软骨细胞，倒置显微镜下观察细胞形态、HE染色和Ⅱ型胶原免疫荧光染色鉴定软骨细胞，rhIL-1β刺激软骨细胞制备体外OA模型，实验分成正常对照组、模型组（10ng/mlrhIL-1β）和实验组（不同浓度双醋瑞因+10ng/mlrhIL-1β），利用①MTT法观察软骨细胞的增殖情况；②流式细胞术观察软骨细胞凋亡率；③应用WesternBlotting和RT-PCR从蛋白质和基因两水平检测p38MAPK的表达。以上实验均重复三次。【结果】①倒置显微镜下观察细胞贴壁后逐渐展开、变平、伸出短小的突出,外观呈多角形、三角形，细胞胞质丰富,胞核清楚,核为圆形或椭圆形,位于胞体中心，核仁为1-3个；HE染色软骨细胞呈多角形,胞质呈均质状染成红色，胞核较大,圆形或椭圆形,位于中央,染成淡蓝色；Ⅱ型胶原免疫荧光染色后胞浆被染成黄绿色,胞核染色不明显。②与正常对照组比较，双醋瑞因能促进软骨细胞MTT增殖活性（P0.01）以浓度为10-5M更明显，IL-1β作用后软骨细胞增殖能力下降（P0.05），但与正常对照组比较浓度为10-4M和10-5M仍能促进软骨细胞MTT增殖活性（P0.05）。③正常对照组的软