生物化学练习及的思考题问答题参考的答案.docVIP

生物化学练习及思考题——问答题参考答案 蛋白质 名词解释：（自己在教材中找答案） 氨基酸的等电点、蛋白质的变性与复性、蛋白质的变构效应、层析技术、两性离子 必需氨基酸、 一级结构、二级结构、三级结构、四级结构 二、全章问答题： 1、写出组成蛋白质的氨基酸的结构通式，根据R基团的极性性质，蛋白质氨基酸可以分为几类，各有哪些氨基酸。 简述氨基酸α-NH2参加的主要化学反应。 （1）亚硝酸盐反应，生成氮气，可以计算氨基酸的量 （2）酰化反应：氨基酸与5-(二甲胺基)萘-1-磺酰氯(DNS-Cl)反应，生成DNS-氨基酸。丹磺酰-氨基酸有很强的荧光性质，1963年，Giray和Hartley将该反应用于多肽链N末端氨基酸的鉴定 （3）烃基化反应： 1）与2,4-二硝基氟苯（DNFB）反应 在酸性条件下水解，得到黄色DNP-氨基酸。该产物能够用乙醚抽提分离。不同的DNP-氨基酸可以用色谱法进行鉴定。1955年，Sanger首先用该反应鉴定多肽或蛋白质的N-端氨基酸 与苯异硫氰酸酯（PITC）反应 生成的苯乙内酰硫脲衍生物(PTH-AA) 是无色的，可用层析法加以分离鉴定。瑞典的Edman用该反应鉴定N-端氨基酸。 （4）形成西佛碱反应：在生物体内，氨基酸分子中的氨基在某些酶的催化下，可与醛酮反应生成弱碱性的西佛碱（Schiff’ base） C=N-。 （5）脱氨基反应：脱去氨基生成α-酮酸。 3、蛋白质为什么能形成稳定的胶体溶液？ 水化膜和双电层 4、试述蛋白质的空间结构的构建。 5、举例说明蛋白质的结构与功能的关系 （1）、一级结构决定决定蛋白质的功能(1分) 1）同功能蛋白质中氨基酸顺序具有种属差异(1分) 2）一级结构相同的蛋白质的功能也相同(1分) 3）一级结构上的细微变化可直接影响其功能(1分) （2）、高级结构与功能的关系 1）蛋白质高级构象破坏，功能丧失(2分) 天然蛋白质在构象上的亚稳定性的，当天然蛋白质受到某些物理因素和化学因素的影响，使其分子内部原有的高级构象发生变化时，蛋白质的理化性质和生物学功能都随之改变或丧失，但并未导致其一级结构的变化，——变性；蛋白质的变性作用如果不过于剧烈，则是一种可逆过程，变性蛋白质通常在除去变性因素后，可缓慢地重新自发折叠成原来的构象，恢复原有的理化性质和生物活性——复性。 2）蛋白质在表现生物功能时，构象发生一定变化(2分) 别构效应：又称变构效应，是指寡聚蛋白与配基结合，改变蛋白质构象，导致蛋白质生物活性改变的现象 6、根据蛋白质的理化性质，详细阐述蛋白质分离提纯的一般步骤和主要方法？ 答：蛋白质分离纯化的一般步骤包括1．样品前处理、粗分级分离和纯化。根据蛋白质的性质，蛋白质分离纯化的方法有： 根据分子大小不同的纯化方法 1）透析和超过滤 2）密度梯度离心：物质大小和密度不同，经密度梯度离心后，每种蛋白质颗粒沉降到与自身密度相等的介质密度梯度时即停止。如蔗糖梯度、聚蔗糖(Ficoll)梯度。 3）凝胶过滤(分子排阻层析)：比凝胶珠孔径大的分子不能进入珠内，比网孔小的分子能不同程度地自由出入凝胶珠的内外。于是，大分子物质先被洗脱，小分子物质后被洗脱。 （2）利用溶解度差别的纯化方法 1）等电点沉淀：等电点溶解度最小 2）盐析 ：在蛋白质溶液中加入大量中性盐，以破坏蛋白质的胶体性质，使蛋白质沉淀，称为盐析。 3）有机溶剂分级分离法 ：甲醇、乙醇、丙酮等均可沉淀蛋白质。①脱水作用；②使水的介电常数降低，蛋白质溶解度降低。一般预先将有机溶剂冷却到-40(C(-60(C，可防止变性。 （3） 根据电荷不同的纯化方法 1）电泳：不同的蛋白质分子所带电荷及电荷量不同，且分子大小也不同，故在电场中的移动速度也不同。 2)离子交换层析 ：用于蛋白质分离纯化的离子交换剂多为纤维素离子交换剂。溶液的pH决定离子交换剂与蛋白质的解离程度。 （4）利用选择性吸附和特异亲和力的纯化方法 利用吸附层析力和解吸性质不同达到分离。如亲和层析：利用待纯化的分子和杂质分子与吸附剂之间的吸附能：利用蛋白质分子对配体特有的识别能力建立的纯化方法。 核酸 试比较DNA 和RNA在化学组成、分子结构、分布和生物学功能等方面的主要特点。 简述DNA双螺旋结构的主要特点 （1）DNA分子由两条多聚脱氧核糖核苷酸链(简称DNA单链)组成。两条链沿着同一根轴平行盘绕，形成右手双螺旋结构。螺旋中的两条链方向相反。 （2）嘌呤碱和嘧啶碱基位于螺旋的内侧，磷酸和脱氧核糖基位于螺旋外侧。碱基环平面与螺旋轴垂直，糖基环平面与碱基环平面成90°角。 （3）螺旋横截面的直径约为2 nm，每条链相邻两个碱基平面之间的距离为3.4 nm，每10个核苷酸形成一个螺旋，其螺矩（即螺旋旋转一圈）高度为34 nm。 （4