生物化学第十章蛋白质的生物合成 课件.ppt

第十章 蛋白质的生物合成;蛋白质的生物合成;遗传信息流动示意图;二、t RNA;mRNA;第一节 遗传密码;遗传密码字典;遗传密码的性质;4、64组密码子中，AUG既是甲硫氨酸的密码，又是起始密码；有三组密码不编码任何氨基酸，而是多肽链合成的终止密码子：UAG、UAA、UGA。 ;核糖体;核糖体的组成;多多核糖体与核糖体循环;原核细胞70S核糖体的A位、P位及mRNA结合部位示意图;真核和原核细胞参与翻译的蛋白质因子; t RNA （transfer ribonucleic asid）在蛋白质合成中处于关键地位，它不但为每个三联体密码子译成氨基酸提供接合体，还为准确无误地将所需氨基酸运送到核糖体上提供运送载体。;（1）被特定的氨酰- tRNA合成酶识别，使tRNA接受 正确的活化氨基酸。;密码子与反密码子的配对关系;第四节 蛋白质生物合成的分子机制;氨基酸的活化;N-甲酰甲硫氨酰-tRNAfMet的形成;氨酰- tRNA合成酶特点;1、肽链合成的起始 2、肽链的延长 3、肽链合成的终止及释放 ; 一、肽链合成的起始 翻译的起始是指携带有起始甲硫氨酸的tRNA和mRNA结合到核糖体上形成起始复合物的过程。大肠杆菌中翻译的起始过程是： 1、mRNA在核糖体小亚基上就位 mRNA靠S-D序列同16S rRNA的互补及IF-3的固定作用和IF-1 的帮助，首先进入核糖体小亚基，这时候AUG的位置正好对应于大亚基的P位。 ; ⒉ fMet- tRNA fMet在核糖体小亚基上就位 在IF-2和GTP帮助下， fMet- tRNA fMet进入小亚基上与起始密码相应的位置 ，整个过程对fMet- tRNA fMet是特异和严格的，其余的氨基酰- tRNA都不能进入到这个位置上。这步还包括IF-1的脱落。 ⒊ 50S大亚基结合到30S小亚基上形成70S起始复合物，同时释放出IF-2、IF-3，GTP水解成GDP和Pi，完成起始过程。;肽链合成的起始; 在起始复合物中，核糖体的P位被mRNA上AUG及其对应的fMet- tRNA fMet占据，而A位则空着，有待于对应mRNA上第二个密码的相应AA- tRNAAA进入，这时进入肽链的延长阶段。 ;肽链的延长;二、 肽链的延长 肽链的延长也称为核糖体循环，每循环一次，肽链延长一个氨基酸，如此不断重复，直至肽链合成终止。每次核糖体循环又可分为三个步骤：进位、成肽和移位。 真核生物的肽链延长与此类似，eEF-1中的eEF-1α、 eEF-1β相当于EF-Tu和EF-Ts， eEF-2相当于EF-G。 ⒈ 进位 即新进入的氨基酰-tRNA根据mRNA上密码的指引，结合到70S核糖体的A位。这一步反应需要GTP和延伸因子EF-Tu和EF-Ts的参与。 ;Tu\Ts循环; ⒉ 成肽 即P位上的N-甲酰甲硫氨酸的－C=O在肽酰转移酶催化下与A位上的AA-tRNA的－NH2发生反应，这样N-甲酰甲硫氨酸在 A位 成为二肽，P位留下一个无负载的tRNA。在成肽反应结束后，这个无负载的tRNA从核糖体上脱落，使P位留空。 ;肽键的形成;⒊ 移位 指在移位酶(又称为延伸因子G，EF-G)催化及GTP存在下，整个核糖体相对于mRNA从5′向3′方向的移动，移动的长度为一个密码子的距离，这时A位的二肽从A位进入P位。 ;移位的结果使二肽-tRNA占据了P位，A位留空，并对应mRNA上第三号密码子，为第三号氨基酸按密码的指引进入A位进位作好了准备。 在整个肽链延长过程中，起始的fMet可保留至翻译终止。但翻译后这一氨基酸会很快被切除，所以在新生的肽链里一般并不以甲硫氨酸作为N-末端。 由多肽链的合成过程可以看出：核糖体阅读mRNA密码是从5′向3′方向进行，肽链合成是从N-末端向C-末端方向进行。 ;原核生物;三 肽链合成的终止 ; 肽链终止的具体过程： ⒈ 当mRNA的终止密码进入A位时，因无AA- tRNA与之对应，所以由RF-1或RF-2识别终止密码，进入A位。RF-3可加强这种作用。 ⒉ RF的结合，使核糖体的转肽酶活性转而表现为酯酶活性，将P位上的肽链从tRNA上水解下来（肽链C端与tRNA 3′－OH酯键的水解）。 ⒊ GTP水解为GDP和Pi，释放的能量使留在核糖体上的 tRNA及各种RF、mRNA脱落下来，最终核糖体