聚合酶链反应及基因突变检测方法ppt上海交通大学医学院检验系欢迎ppt课件.pptVIP

* * * * * The Theory of the amplification kinetics is much different then what is actually observed. Picture explains the actual kinetics of the PCR process. Remember, PCR is an enzymatic process and is therefore affected by the same factors that effect ANY Enzymatic process. * * * * * * * * * * * Self explanatory * * * * * * * 2. 变性梯度凝胶电泳（DGGE） 利用不同序列的DNA分子具有不同的融点温度(Tm)的特性。设计引物时使被扩增的目的片段含有2个不同的区域，一个Tm较高，另一个较低，将该PCR产物在由变性剂形成的梯度凝胶上进行电泳，由于正常序列的PCR产物与突变的 PCR 产物的Tm不同，在电泳过程中Tm较低的区域被部分解链的先后不同，造成电泳迁移率的变化也不同，最后在凝胶中所处的电泳位置也不同，据此可以区别正常片段与突变片段。 3.异源双链分析（heteroduplex analysis，HA） 正常DNA和突