上海医学编辑部感谢编辑和审稿人对文章白藜芦醇在调控DsbA-L.DOC

《上海医学》编辑部， 感谢编辑和审稿人对文章“白藜芦醇在调控DsbA-L基因表达中的作用”（稿件编号：2014050400455）提出的修改意见，根据审稿意见我们对文章进行了修改及补充，修改及补充部分在修改稿中以红色表示，回复意见如下。 审稿意见 结果部分行文不够规范，如“我们在既往研究中发现，位于DsbA-L基因内含子1的+391到+432bp区域存在一个Sp1结合位点，转录因子Sp1通过与此位点结合负性调控DsbA-L基因的转录[11]，那么白藜芦醇对DsbA-L基因启动子活性的上调作用是否与此Sp1结合位点有关？”这样的内容不适合出现在结果部分。 已在结果部分删除此部分，并调整至引言部分。 结果部分有如下描述：“DsbA-L的表达在 mRNA水平（图1A）和蛋白水平（图1B）”，查看图1A和图1B，与文字部分不符，请作者认真核对。 已对图1以及文字描述部分进行补充和修改。 “位于DsbA-L基因内含子1的+391到+432bp区域存在一个Sp1结合位点”，+391到+432bp区域怎么会在内含子区域(应该被转录)？ 作为真核生物基因组主要成员的内含子通过内含子序列本身含有的转录增强元件或抑制元件影响基因的转录及表达，通常基因的内含子1对其表达具有重要的调节作用[20 ]。已将此内容补充在讨论部分。 如可以请引用上海医学文献一篇， 已引文献[2] 白藜芦醇在调控DsbA-L基因表达中的作用基金项目：上海市科委基础研究重点项目（10JC1412400）作者单位：215006 苏州大学医学部（杨文静）；200233 基金项目：上海市科委基础研究重点项目（10JC1412400） 作者单位：215006 苏州大学医学部（杨文静）；200233上海市糖尿病重点实验室、上海市糖尿病研究所、上海交通大学附属第六人民医院内分泌代谢科（方启晨，张菁，任伟，宋倩倩，贾伟平） 通讯作者：方启晨，Email：qcfang@ 杨文静 方启晨 张菁 任伟 宋倩倩 贾伟平 【摘 要】 目的 探讨白藜芦醇对DsbA-L基因转录的影响。方法 采用实时荧光定量PCR和Western blot检测3T3-L1细胞和HepG2细胞DsbA-L mRNA和蛋白表达水平。以荧光素酶报告基因实验分析白藜芦醇对DsbA-L基因启动子活性的影响。用电泳迁移率变动分析法（EMSA）检测白藜芦醇对转录因子Sp1与DsbA-L基因内含子1区域Sp1结合位点的结合能力的影响。用Western blot检测Sp1蛋白表达水平。结果 （1）在3T3-L1细胞和HepG2细胞中，白藜芦醇能够上调DsbA-L mRNA和蛋白的表达。（2）白藜芦醇显著增加DsbA-L基因启动子报告基因质粒的荧光素酶活性，而对缺失Sp1结合位点的突变报告基因质粒的荧光素酶活性无显著影响。（3）白藜芦醇显著下调转录因子Sp1的表达，使Sp1与DsbA-L基因内含子区DNA的特异结合降低。结论 白藜芦醇通过抑制Sp1表达，上调DsbA-L基因的转录从而促进DsbA-L蛋白的表达。 【关键词】 白藜芦醇 ； DsbA-L；启动子 ；Sp1 The role of resveratrol in regulation of DsbA-L gene transcription. YANG Wenjing, FANG Qichen, ZHANG Jing, REN Wei, SONG Qianqian, JIA Weiping. Medical College of Suzhou University, Jiangsu 215006, China; Department of Endocrinology and Metabolism, Shanghai Jiao Tong University Affiliated Sixth People’s Hospital, Shanghai Diabetes Institute, Shanghai Key Laboratory of Diabetes Mellitus, Shanghai Clinical Center of Diabetes, Shanghai 200233, China 【Abstract】 Objective To explore the potential mechanism of resveratrol-induced upregulation of the DsbA-L gene. Methods The DsbA-L mRNA and protein levels were detected by real time quantitative PCR and Western blot, respectively. The promot