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- 2018-08-09 发布于浙江
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* 水溶性大分子通过共价键与酶分子结合后,可使酶的空间结构发生某些改变,使酶的活性中心更有利于和底物结合,并形成准确的催化部位,从而使酶活力得以提高。 * 水溶性大分子与酶结合后,可在酶的外围形成保护层,使酶的空间结构免受其它因素影响,从而增加酶的稳定性,延长其半衰期。 * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 2.羧基修饰 常用的羧基修饰剂有:碳二亚胺、乙醇—盐酸试剂、异恶唑盐等。其中水溶性的碳二亚胺类特定的修饰酶的羧基已成为最普遍的标准方法,它在比较温和的条件下就可以进行。 3.胍基修饰 蛋白质分子中精氨酸残基的侧链是胍基。采用二羰基化合物与胍基反应生成稳定的杂环改变酶分子的性质和结构的方法称为胍基修饰。胍基修饰剂有:环己二酮、丙二醛、苯乙二醛等。 巯基在维持亚基间的相互作用和酶催化过程中起重要作用,巯基具有很强的亲核性,在含有半胱氨酸的酶分子中是最容易反应的侧链基团。已经开发了许多修饰巯基的特异性修饰剂。其中Ellman 试剂[DTNB, 5’5’-二硫代-双(2-硝基)苯甲酸]是最常用的巯基修饰剂,可以对酶分子中巯基的数目进行定量,用于研究巯基改变程度和巯基所处的环境以及蛋白质的构象变化。 4.巯基修饰 [DTNB, 5’5’-二硫代-双(2-硝基)苯甲酸] DTNB与巯基反应形成二硫键,释
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