植物的茎尖养脱毒技术.pptxVIP

植物的茎尖培养脱毒技术 植物茎尖脱毒技术利用植物茎尖组织培养，结合血清病毒检测技术，在防蚜传毒条件下，将影响植物正常生长的植物病毒脱除的高新农业生物技术。茎尖脱毒主要包括表面灭菌、茎尖剥离、茎尖培养等步骤。 原理及依据 病毒在植物体内分布不均，茎尖处含量最少 在一个植物体内，病毒易于通过维管系统而移动，但在分生组织中不存在维管系统。病毒在细胞间移动只能通过胞间连丝，速度很慢，难以赶上活跃生长的茎尖； 在旺盛分裂的分生细胞中，代谢活性高，竞争抑制了病毒的复制； 在茎尖存在高水平内源生长素，也可能抑制病毒的增殖。 主要方法步骤 （1）茎尖的剥离：此步是技术关键，一般在解剖镜下操作。2-3cm的茎段，剥去大叶，水冲洗1h左右，酒精快速消毒，无菌条件下5%漂白粉溶液（或其他消毒剂）消毒7-10min，无菌水清洗，解剖镜下剥取茎尖。 （2）切取茎尖的大小虽然切取茎尖越小，带有病毒的可能性就越小，但组织培养中，切取的茎尖太小，则不易成活。不同种类的植物和不同病毒，切取的最适茎尖大小也不同。 （3）组织培养常用基本培养基是MS培养基，它有较高浓度的无机盐，对促进组织分化和愈伤组织生长有利；植物生长调节的种类和配比依培养种类和生长时期来调整。 酒精擦拭手 外植体消毒 浸泡5-7min 器械消毒 酒精灯灼烧 酒精擦拭培养皿 酒精擦拭 旋转灼烧 显微镜下获取茎尖 接种 盖好瓶塞 几种方法的配合使用是提高植物脱毒效果： (1) 高温热处理与微茎尖脱毒培养技术 (2) 高温热处理与微（体）茎尖嫁接培养技术 (3) 化学处理与茎尖脱毒培养技术 香石竹脱毒的具体操作过和如下： （1）热处理 将盆栽植株或离体瓶苗，在36～38℃下处理2周，或每天在36℃16小时和38℃8小时处理共30天，光照为3000lx。 （2）表面消毒 选取盆栽香石竹植株叶腋间生出的侧芽为外植体，先用自来水冲洗半小时，用75%的酒精消毒30秒，再用2.5%次氯酸钙或次氯酸钠溶液处理15分钟,取出后用无菌蒸馏水清洗4次,用无菌滤纸吸去多余水分备用。 （3）茎尖剥离 在双筒解剖镜下。切除叶片使芽体暴露，用解剖针剥掉幼叶，直到只剩下2个最幼小的叶原基。 （4）茎尖培养 用小刀片切下茎尖放入培养基。培养条件为25℃，光照16小时，光照强度为2000lx，平均两周进行一次转接，5～7周可获得单个小植株。 （1）热处理 将盆栽植株或离体瓶苗，在36～38℃下处理2周，或每天在36℃16小时和38℃8小时处理共30天，光照为3000lx。 植物的茎尖培养脱毒技术优缺点： 茎尖生长点的培养成了去除植物病毒，使植物复壮的重要方法。茎尖培养还可以去除其他病原体，如细菌、真菌等。 茎尖越小，去病毒机会越大，脱毒效果就越好，但同时因为其含营养及水量太低，故培养时对培养基的要求就越高，对剥离技术要求也越高。 植物的茎尖培养脱毒技术应用 茎尖脱毒培养对植物病毒的脱除效果好，后代遗传性稳定，是目前生产上最常用的脱毒措施，已在马铃薯、花卉、水果、蔬菜等作物脱毒快繁上得到了广泛应用。