§7.3标记免疫分析.pptVIP

在正常情况下，免疫复合物中的稀土离子自身的荧光信号较弱。加入酸性增强液后，稀土离子从免疫复合物中解离出来，与增强液中的?二酮体、三辛基氧化膦或Triton X-100等重新形成一种微胶体化合物。其中的Eu3+在340 nm光激发下，可发出长寿命的高强荧光（613 nm）（图7.12），强度增加106倍，用时间分辨荧光仪记录下来进行分析检测。 图7.12 时间分辨荧光免疫分析原理示意图 §7. 3. 6 化学发光免疫分析 酶免疫分析法克服了RIA中放射性污染的弊病，具有灵敏度高，设备简单，操作安全等优点，但也存在酶不稳定、光度测量范围窄等不足之处。随着免疫测定应用的日新月异以及分析方法及相关技术的发展，20世纪70年代末，Halmann和Velan建立了化学发光免疫分析（CLIA）。发光免疫分析是以发光物质为标记物，通过偶联反应，使标记物分子中的反应基团直接连接在标记免疫分子上。其检测原理与以上方法相类似。 化学发光免疫分析具有免疫反应的特异性，又兼有发光反应的高敏感性，因此满足了快速、简单、稳定、灵敏、特异和准确等要求。其最小检出限可达10-12～10-15 mol。 发光免疫分析以化学发光反应为基础。在常温下，一些特定的化学反应产生的能量使其产物或反应中间态分子激发，形成电子激发态分子；当其衰退至基态时，所释放出的化学能量以可见光的形式发射，这种现