1011易位甲基胞嘧啶双加氧酶―1结构和去甲基化作用及生物学功能.docVIP

1011易位甲基胞嘧啶双加氧酶―1的结构和去甲基化作用及生物学功能 　　[摘要]101l易位甲基胞嘧啶双加氧酶（TET）-1是发挥DNA去甲基化作用重要的蛋白质之一，始见于急性髓系白血病相关的染色体易位t（10；11）（q22；q23）的白血病患者，其c端为双加氧酶区，是TET-1的主要催化功能结构域，可将5-甲基胞嘧啶（5-mC）氧化为5-羟甲基胞嘧啶，经主动或被动去甲基化实现DNA去甲基化。TET-1通过参与DNA去甲基化调节基因表达，在胚胎发育、体细胞重编程、肿瘤发生、神经细胞发生发育等过程发挥作用，在成体细胞中参与调控细胞分化与增殖。TET-1蛋白及其介导的5-mC羟甲基化过程深化了人们对DNA碱基修饰多样性及复杂性的认识，其在干细胞增殖与分化和肿瘤发生等过程中的功能研究，为诸多生理现象和疾病发生发展作了新的诠释。 　　[关键词]1011易位甲基胞嘧啶双加氧酶；DNA甲基化；DNA去甲基化；5-甲基胞嘧啶；5-羟甲基胞嘧啶 　　[中图分类号]Q 51 [文献标志码]A [do]10.7518/gjkg.2015.03.019 　　DNA甲基化或去甲基化是重要的表观遗传修饰形式之一，DNA甲基化指DNA中CpG二核苷酸的胞嘧啶（C）被选择性添加甲基，DNA去甲基化则是去除甲基的过程，两者参与调节基因的表达，与个体生长发育及各项生理活动密切相关。1011易位甲基胞嘧啶双加氧酶（ten-eleven translocation methylcvtosine dioxygenase，TET）-1可以将5-甲基胞嘧啶（5-methyl cytosine，5-mc）氧化为5-羟甲基胞嘧啶（5-hydroxymethvl cytosine，5-hmc），进一步经主动或被动去甲基化实现DNA去甲基化，是发挥DNA去甲基化作用的重要蛋白质。TET-1通过参与DNA去甲基化调节基因表达，在胚胎发育、体细胞重编程、肿瘤发生等过程起重要作用。 　　1.TET-1的结构 　　TET-1初始发现于急性髓系白血病相关的染色体易位t（10；11）（q22；q23）的白血病患者，故此得名。TET-1基因位于10q22，至少含12个外显子，编码2 136个氨基酸，蛋白的相对分子质量为2.353×10。TET-1属于a-酮戊二酸（U-OXOghtarate，ot-OG）和Fe2+依赖的双加氧酶，其N端有一个典型的CXXC型锌指结构，因此也称CXXC6和LCX（leukemia-associated protein with a CXXC domain）等。其C端为双加氧酶区，称SD区，由富含半胱氨酸区、双链B螺旋2-OG-Fe2+-依赖的双加氧酶区（double-stranded B-helix 2-OG-Fd+-dependent dioxygenase domain，DSBH）及间隔区组成，具有氧化活性，是TET的主要催化功能结构域，可将5-mC转化为5-hmC。除上述结构域外，TET-1含有的三个核定位信号（AA20-50、620-653、1158～1162），可与DNA结合，提示其在核内的潜在功能。TET-1不仅可识别、结合未修饰的胞嘧啶，更倾向于结合被修饰的5-mC和5-hmC且富集于高CpG区域。 　　2.TET-1的去甲基化作用 　　TET-1主要在胎儿组织和干细胞中表达，参与DNA主动及被动去甲基化，即5-mC转化为5-hmC的过程。其主动去甲基化催化机制为：在Fe2+和维生素c的辅助下，氧和a-OG在为5-mC提供羟基的同时，a-OG氧化脱羧生成琥珀酸，5-mC则转化为5-hmC。5-hmC是去甲基化过程中重要的中间体，一方面，5-hmc可在活化诱导脱氨酶（activation-induced deaminase，AID）或载脂蛋白B RNA编辑催化蛋白（apolipoprotein B mRNAediting catalytic component，APOBEC）-1催化下生成5-羟甲基尿嘧啶（5-hydroxymethyhracil，5-hmU），5-hmu被胸腺嘧啶-DNA糖基化酶（thymine-DNA glycosylase，TDG）识别并切除，最终通过碱基切除修复（base excision repair，BER）途径将该位点转化为c，实现DNA去甲基化；另一方面，TET-1可进一步催化5-hmC转化为5-甲酰胞嘧啶（5-formyl cytosine，5-fC）和5-羧基胞嘧啶（5-carboxyl cytosine，5-caC），后者可被TDG识别并切除，经BER途径实现甲基去除。此外，TET-1与胞嘧啶及修饰后胞嘧啶的结合可能阻碍后者与DNA甲基转移酶（DNA methyltransferase，DNM