实验八快速抽提质粒.docxVIP

前 言 生物化学的迅速发展，在很大程度上有赖于生物化学实验技术的进步。许多生化理论成果，如果不了解其实验研究过程，是难以得到深刻的理解与牢固的掌握。因此，学生在学习生物化学理论的同时，应该对生物化学实验技术有所了解与掌握。 生物化学实验技术发展很快，种类很多，要在短时间内全面掌握是不现实的。但是学生能对一些常用的基本生化实验方法，通过亲自的操作而有所认识，显然会有助于生化理论的学习与理解。并为将来进一步开展医学研究工作奠定基础。 我们选择了一些常用生化实验方法，供学生操作，其中包括了生化实验技术的各个方面，以定量实验为主，特别注重了医学生化技术的基本原理，希望学生通过这些实验的全过程训练后，能够从多方面理解这些技术的意义及用途，能对这些生化技术有比较全面的认识。随着生物化学的发展，分子生物学实验技术也越来越多地应用到生化的研究领域。我们在本次编写的实验指导中增加了一些分子生物学的实验方法，目的是让学生对分子生物学实验有所了解，同时，对生物化学研究发展方向也有所知晓。因此，本讲义共选择三部分内容：第一部分：基本生化实验；第二部分：分子生物学综合实验；第三部分：生化实验英语教材（针对B.B.M.S学生）。 由于受学时数的约束，我们未能把生物化学所有的实验技术都编入其中，只局限于一部分对医学生学习生化可能会有帮助的实验。另外，限于我们业务技术水平等原因，本实验指导可能有一些缺点和不够完善之处，敬请批评、指正。 编者 2010．5 不迟到早退。 不迟到早退。 目 录 第一部分 基本生化实验 实验一 蛋白质的吸光分析测定 1 吸光分析法的原理与仪器 一、 改良Lowry 比色法（Hartree法） 1 二、 考马斯亮蓝结合法 6 三、 紫外分光光度法 7 实验二 酶促反应动力学实验 8 一、 pH对酶促反应速度的影响 8 二、 温度对酶促反应速度的影响 10 三、 底物浓度对酶促反应速度的影响 11 （碱性磷酸酶Km值的测定） 四、 抑制剂对酶促反应的影响 13 实验三 氨基酸代谢实验 15 一、 肝脏谷丙转氨酶活性测定 15 二、 联合脱氨基作用的检定－等温蒸馏定氨法 16 实验四 肝糖原实验 20 肝糖原的提取和定量 20 饱食、饥饿和激素对肝糖原含量的影响 22 实验五 细胞培养技术 24 实验六 细胞与细胞核的分离技术 26 一、 细胞的分离技术 26 二、 细胞核的分离与纯化