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Protein and Enzyme Engineering蛋白质与酶工程 第七章 思考题： 1酶反应器与发酵反应器的区别。 2试比较各类酶反应器的优缺点。 3选择酶反应器时需考虑哪几方面的因素？ 4设计酶反应器时需考虑哪些操作参数？ 思考题 5酶反应器在使用过程中应注意哪些问题？如何防止酶反应器的微生物污？ 6常见的酶反应器有哪些类型？其基本特征是什么？ 7什么是连续式酶生化反应器，它包括哪两种理想模型？各有何特点？ [教学目的] 掌握酶反应器类型、选型以及酶反应器的操作调控 [重点与难点] 1、酶反应器设计的基本步骤； 2、酶反应器类型的选择。 [课堂教学设计] 图示，形象化讲解反应器类型、构造。讲授和自学相结合。 [教学时数] 4学时 酶传感器 固定化酶在酶传感器方面的应用 酶传感器固定化酶+能量转换器(电极、场效应管、离子选择场效应管)，属于生物传感器的一种 酶电极:固定化酶+电极，应用最广泛; 用途: 临床诊断、工业发酵过程控制、环境监测 生物传感器 用生物活性材料（酶、蛋白质、DNA、抗体、抗原、 生物膜等）与物理、化学传感器有机结合的一门交叉学科，是发展生物技术必不可少的一种先进的检测方法与监控手段，也是物质分子水平的快速、微量分析方法; 在未来21世纪生物经济发展中，生物传感技术将是介于信息和生物技术之间的新增长点; 中国生物传感器的研究起步于 70年代末期 。早期研究普遍采取氧电极作生物反应中的换能器 ,以葡萄糖氧化酶为活性材料 生物传感器(续) 生物传感器(续) 传感器能将一种被测信号（参量）转换成一种可输出信号的装置。 生物传感器(biosensors):用生物成分作为感受器的传感器。由感受器、换能器、电子线器组成 生物传感器(续) SBA-60型生物传感在线分析系统 葡萄糖氧化酶电极 1962年 Clark和Lyons提出模型 1967年 Updike和Hicks首先制造 聚丙烯酰胺凝胶包埋法固定化葡萄糖氧化酶，酶膜强度20~50um 基本结构酶膜+多分子膜(聚四氟己烯等)+氧电极 青霉素酶电极 酶膜:青霉素酶+聚丙烯酰胺凝胶(或光交联树脂) 电极:pH电极 结合:酶膜紧贴在玻璃(pH)电极上 反应: 固定化酶在酶传感器方面的应用(续) 固定化酶在酶传感器方面的应用(续) SBA-70型生物传感在线血糖乳酸自动分析系统 药物控释载体 药物应用临床不顺利的原因: 蛋白类药物被胃酸破坏 被肝和血液中的酶系统清除 药物本身毒副作用 免疫问题 药物稳定性差 建立合理的给药体系，核心是从时间和空间分布上控制药物的释放 控释体系涉及到将药物与聚合物载体偶联或固定于某种聚合物载体上，也称载体药物 (1) 聚合物修饰 (2)凝胶包埋 (3)微球制剂 (4)脂质体 (5)导向药物 （三）反应操作要求 1.若酶受高浓度底物抑制 需要不断调整pH ——搅拌罐型反应器。 2.若反应耗氧 ——鼓泡塔型反应器。 （四）酶的稳定性 固定化酶在反应器中催化活性的损失可能有如下三种原因： 酶本身失效； 酶从载体上脱落； 载体肢解。 在各种类型的反应器中，CSTR最易引起这类损失。 （五）应用的可塑性及成本 CSTR类型的反应器应用的可塑性较大，结构简单，成本也较低； 综上所述，酶反应器的选择没有一个简单的法则或标准可以遵循，必须根据具体情况进行全面的分析和衡量。 三、酶反应器的操作 （一）反应温度的确定与调节控制 （二）pH值的确定与调控 （三）底物浓度 （四）酶浓度 （五）搅拌速度 （六）流动速度 go 一、概述 早期的血糖速测仪 我国第一种实用化的生物传感器---SBA-30型乳酸分析仪 维生素C速测仪 二、生物传感器组成和工作原理 感知固定化配基与待测物结合产生的微小变化，把这种变化转化为其它可识别信号，其质量好坏决定了传感器的灵敏度。 换能器 是生物传感器的心脏，整个生物传感器的核心技术也在此。制备分两方面工作，一是选择最佳载体材料（需活化）；二是在载体表面固定化亲和配基（非共价和共价） 感受器 ??????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????? back 图5-1 葡萄糖氧化酶电极 半透膜 酶胶层 感应电极 酶电极示意图 ?－D－葡萄糖＋O2 D－葡萄糖酸－1，5－内酯＋H2O 葡萄糖＋醌＋H2O 葡萄糖酸＋氢醌 葡萄糖氧化酶 氢醌 醌＋2H＋＋