骨髓来源的血管内皮祖细胞移植治疗下肢缺血的动物实验研究.pdfVIP

青岛大学硕士学位论文 胞形成不同大小、分散的细胞集落，集落逐渐增大，细胞多呈梭形，，伸出长短不一、 粗细不均的突起，胞核大，可见较多的分裂相(图2)。悬浮细胞随换液次数的增多 逐渐除去，贴壁细胞形态趋于均一。约14d融合80％以上，细胞呈单一的扁平梭形(图 3、图4)。 2．2传代细胞观察 传代后的细胞很快贴壁，增殖迅速呈集落的方式生长，形态仍为扁平的梭形。 传代细胞生长较原代快，约7d铺满培养瓶底，细胞排列更加有序(图5)。骨髓MSCs 传代细胞的生长较原代快，多于接种后7d即可铺满瓶底的8096。传代细胞生长过程 大致分为：(I)潜伏期：此期为细胞对分离和传代操作所致损伤的恢复以及适应新生 环境的过程。传代细胞的生长潜伏期约为24～96h；(2)对数增长期：此期细胞数 量呈对数增长，每次传代细胞的对数生长期约为3～5d；(3)停滞期：对数生长期后， 细胞不再增殖，生长活动停滞。 2．3细胞活力 第1～3代细胞成活率大致相同，约为97％，第4代成活率略有下降约为95％。 第5代细胞活力仍有下降趋势，细胞成活率仅为93％(表1)。 2．4免疫荧光结果 免疫荧光染色：免疫荧光染色荧光显微镜下观察显示所培养的细胞有CD44阳性 表达(图6)，CD34呈显阴性表达。 3