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两种盐对质粒DNA提取的影响 　　[摘 要]随着基因治疗及基因疫苗的不断发展，质粒的需求量迅速增加。通过以pcDNA3为目的产物，考察了在其提取过程中硫酸铵和氯化钙的加入对pcDNA3收率的影响和对杂质的去除效果。实验发现：硫酸铵和氯化钙的加入都可以明显降低质粒提取液中蛋白质、RNA杂质的含量；但是氯化钙在降低蛋白质和RNA含量的同时也降低了质粒DNA的收率。硫酸铵是去除蛋白质、RNA杂质的良好试剂，同时能够保持较高的质粒DNA收率。当质粒提取液中硫酸铵浓度加入到2.5 M时，质粒的纯化因子可达到10.2，而收率在90% 以上。 　　[关键词]基因治疗 基因疫苗 质粒 纯化 硫酸铵 氯化钙 　　中图分类号：O69 文献标识码：B 文章编号：1002－6908（2007）0620019－01 　　 　　近些年来，随着基因工程、基因治疗和基因疫苗的不断发展，质粒的需求量迅速增加。从菌体中得到质粒粗品的方法有煮沸法、碱裂解法、SDS裂解法等，其中碱裂解法是提取质粒最常用的方法。为了达到药用标准，要对质粒粗品进行进一步纯化，其中色谱分离是纯化质粒的最有效方法。为了降低色谱操作的负荷,，提高色谱分离的效率，在色谱操作之前往往要先对质粒提取液进行初步的纯化，降低杂质的含量。RNA 和蛋白质是质粒提取液中的两种主要的杂质。在常规的分子生物学实验中RNA 的去除，一般先用RNA 酶对其