从发酵液中提取菌丝体.PPT

香菇多糖的生产工艺 精化1121 梅飞轮 主要内容 认识产品 追根求源 生产技术 一 认识产品 1 结构式 二 追根求源 2 各种生产方法比较 热水浸提法 酶解法 超声波提取法 微波提取法 深层发酵培养提取法 01.热水浸提法 02.酶解法 03.超声波提取法 04.微波法提取香菇多糖 05.深层发酵培养提取法 * 2 性质 物理：白色或棕黄色粉末状固体 化学：能溶于0.5M NaOH溶液中，溶解度可达50-100mg/ml；不溶于甲醇、正丁醇、高浓度乙醇、丙酮等有机溶剂。 生物：抗肿瘤，抗病毒 3 产品的功能 免疫调节功能 抗肿瘤 抗感染 保肝作用 抗氧化、延缓衰老 抗突变作用 抗病毒作用 保健品 广西桂林实力天然食品有限公司生产的荷仕威香菇多糖颗粒冲剂有免疫调节的功效 治疗各种感染 香菇多糖注射液与抗生素合用,能有效防治反复呼吸道感染的发生。 药品 配合其他药物治疗慢性乙肝,可提高乙肝病毒标志物的转阴作用 农药 香菇多糖0.5%水剂对番茄病毒病、烟草病毒病有较好的抗病毒作用 4 产品的应用 5 产品的质量标准 1 诞生与发展过程 1968 年日本千原吴郎首先利用热水从香菇子实体中浸提出6 种胞外LNT5 1970 年Chihard 和Sasaki 用热水浸提结合有机溶剂沉淀从香菇中提取到另外4 种多糖。 1986年获日本厚生省批准生产并外销。 1988年我国卫生部批准进口，现今我国已有几家国产LNT上市(如南京振中和福州梅峰等)。香菇多糖由于是单一组分，质量易于控制，且具有疗效高，剂量低，毒副作用小等优点，受到医生的青睐。 近年来，LNT的广泛药理作用研究取得了很大进展。 06 方法比较 3 现在常用的生产方法 深层发酵培养提取法 三 生产技术 1 原料及要求 1 .1 菌种 鸡腿蘑(Corprinus comatus)菌株Co一1由河南科技大学林学院园艺研究所提供。 1．2主要试剂 葡萄糖 麦芽糖 乳糖 可溶性淀粉 硝酸钾 硫酸铵 酵母膏 蛋白胨 磷酸二氢钾 硫酸镁 硫酸钙 苯酚 硫酸 无水乙醇 三氯甲烷(氯仿) 正丁醇 碳酸氢钠 氢氧化钠 DEAE-纤维素32 SephadexG-200 分析纯 分析纯 分析纯 生化试剂 分析纯 分析纯 生化试剂 生化试剂 分析纯 分析纯 分析纯 分析纯 分析纯 分析纯 分析纯 分析纯 分析纯 分析纯 生化试剂 生化试剂 天津市科密欧化学试剂开发中心 北京益利精细化学品有限公司 天津市科密欧化学试剂开发中心 天津市科密欧化学试剂开发中心 西安化学试剂厂 北京化工厂 北京奥博星生物技术有限责任公司 北京双旋微生物培养基制品厂 天津石英钟厂霸州市化工分厂 北京化工厂 西安化学试剂采购站经销(秦岭化工厂) 天津博迪化工有限公司 开封东大化工(集团)有限公司试剂厂 国药集团化学试剂有限公司 国药集团化学试剂有限公司 天津市化学试剂一厂 北京化工厂 上海试剂四厂昆山分厂 市售 北京欣经科生物技术公司 斜面培养基(％)：马铃薯20，葡萄糖2，KH2P04 0．2，MgS04 0．05，琼脂2，VBxl0 mg／L,，pH6．0 液体种子培养基(％)：马铃薯20，葡萄糖2，KH2P04 0．2，MgS04 0．05，玉米浆0．5，pH6．0 发酵基础培养基(％)：葡萄糖2，蛋白胨0．2，KH2P040．2，MgS040．1，玉米浆0．5，pH6．0 发酵优化培养基(％)：玉米淀粉4，黄豆饼粉0．2，蔗糖3，KH2P04 0．1， MgS04 0．1，Cas04 O．05，玉米浆0．5，pH6．0 1．3培养基 2 生产原理 利用深层液体发酵培养香菇菌丝体后，从发酵液中提取菌丝体，从而得到胞内香菇菌丝体，再从菌丝体中，利用它在酒精和水，及酶液的不同溶解度来提取胞内多糖。将菌丝体抽提、浓缩、离心，取上清液脱色透析，透析液再浓缩、离心，最后用溶液沉淀、洗涤干燥而成。 3 工艺流程 4 工艺流程说明及主要工艺参数 菌种活化 将保藏的鸡腿蘑菌种转接于斜面培养基上，25℃培养至满管。选择菌丝生长旺盛的菌种备用。 斜面培养 从已活化的斜面菌种中取出约O．5锄2大小的菌丝块，接种于空白斜面培养基中部，于25℃培养至满管。 液体种子培养 将斜面菌种切割成约0．5cm2大小的菌丝块，接种于装有lOOmL液体种子培养基的250mL锥形瓶中，每瓶接半支斜面。于25-26C，140．150r／min振荡培养4d。 摇瓶培养 将液体种子按10％接种量接种于装有90mL液体培养基的250raL锥形瓶中，于 25．26℃，140-150f／rai