第10篇 遗传密码.pptVIP

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一. 遗传密码—三联子 mRNA上每3个核苷酸翻译成蛋白质多肽链上的一个氨基酸,这3个核苷酸就称为密码子。也叫三联子密码。 遗传密码: mRNA中核苷酸的排列顺序。 起始:AUG 终止:UAA UAG UGA 方向:5 ’ -3’(mRNA) 二. 遗传密码的破译 遗传密码的破译,即确定代表每种氨基酸的具体密码。 蛋白质中的氨基酸序列是由mRNA中的核苷酸序列决定的。mRNA中只有4种核苷酸,而蛋白质中有20种氨基酸。 数学考虑 : 一种碱基 → 一种 Aa 41 = 4 <20 二种碱基 → 一种 Aa 42 = 16<20 三种碱基 → 一种 Aa 43 = 64>20 1.实验证实三联子密码 1、mRNA模板中插入、删除一个核苷酸后,该密码子后面的氨基酸序列全部改变。 2、同时插入、删除一个不同核苷酸后,后续蛋白质不变。 3、同时删除三个核苷酸后,翻译减少一个氨基酸,序列没有变化。 烟草花叶病毒外壳蛋白亚基由400个氨基酸组成,而相应的RNA片段长约1200个核苷酸 A. 以均聚物、随机共聚物和特定序列的共聚物为模板指导多肽的合成 制备大肠杆菌的无细胞合成体系: (在含DNA、mRNA、tRNA、核糖体、AA-tRNA合成酶及其他酶类的抽提物中加入DNase,降解体系中的DNA,耗尽mRNA时,体系中的蛋白质合成即停止) 当补充外源mRNA或人工合成的各种均聚物或共聚物作为模板以及ATP、GTP、氨基酸等成分时又能合成新的肽链,新生肽链的氨基酸顺序由外加的模板所决定。因此,分析比较加入的模板和合成的肽链即可推知编码某些氨基酸的密码。 以多聚三核苷酸作为模板可得到有3种氨基酸组成的多肽。如以多聚(UUC)为模板,可能有3种起读方式: 5 ’ ……UUC UUC UUC UUC UUC……3’ 或5 ’ ……UCU UCU UCU UCU UCU……3’ 或5 ’ ……CUU CUU CUU CUU CUU……3 ’ 根据读码起点不同,产生的密码子可能是UUC(Phe)、UCU(Ser)或CUU(Leu),所以得到的多肽可能是多聚苯丙氨酸、多聚丝氨酸或多聚亮氨酸,由此可知UUC、UCU、CUU分别是苯丙氨、丝氨酸及亮氨酸的密码子。 B 核糖体结合技术 1964年Nirenberg又采用三联体结合实验 (1) tRNA和氨基酸及三联体的结合是特异的; (2) 上述结合的复合体大分子是不能通过硝酸纤维滤膜的微孔,而tRNA-氨基酸的复合体是可以通过的。 ? 这个方法是以人工合成的三核苷酸如UUU、UCU、UGU等为模板,在含核糖体、AA-tRNA的适当离子强度的反应液中保温,然后使反应液通过硝酸纤维素滤膜。 发现,游离的AA-tRNA因相对分子质量小能自由通过滤膜,加入三核苷酸模板可以促使其对应的AA-tRNA结合到核糖体上,体积超过膜上的微孔而被滞留,这样就能把已结合到核糖体上的AA-tRNA与未结合的AA-tRNA分开。 肽链内部Met的密码子 AUG:原核生物编码甲酰甲硫氨酸起始密码 真核生物编码甲硫氨酸 另有三种是终止密码(标点密码子、无意义密码子),根据无义突变的三种昵称,三个终止密码子: UAA叫赭石(ochre)密码子(相应于赭石突变); UAG叫琥珀(amber)密码子(相应于琥珀突变); UGA叫蛋白石(opal)密码子(相应于蛋白石突变)。 2. 密码子的变偶性-摆动假说(Wobble base) 变偶性——密码子的第三位碱基比前三个碱基具有较小的专一性。 即在密码子与反密码子配对时,前面两对碱基严格按碱基配对原则,而第三时碱基允许有一定的自由度——摆动假说,变偶假说。 根据摆动假说,在密码子与反密码子的配对中,前两对严格遵守碱基配对原则,第三对碱基有一定的自由度,可以“摆动”,因而使某些tRNA可以识别1个以上的密码子。 3. 遗传密码的通用性和变异性 遗传密码无论在体内还是体外,也无论是对病毒、细菌、动物还是植物而言都是适用的,所以,密码子具有通用性。已经查明,在支原体中,终止密码子UGA被用来编码色氨酸;在嗜热四膜虫中,另一个终止密码子UAA被用来编码谷氨酰胺。密码子具有特殊性。 2)中间碱基是C时,相应的氨基酸是非极性的或具有不带电荷的极性侧链; 3)中间碱基是A或G时,其相应氨基酸常在球蛋白外周,具有亲水性; 五. 密码子是不重叠的并且无标点 A B C D E F G H I J K H Aa1 Aa2 Aa3 Aa

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