2012.3本科生生物化学实验电泳技术原理幻灯片.pptVIP

* * 电泳原理与技术 移动界面电泳(moving boundary electrophoresis) 区带电泳(zone electrophoresis) 稳态电泳(steady state electrophoresis) 其中以区带电泳为目前常用的电泳系统。 依据技术原理，电泳可分三种形式: 任何电泳技术方法，均是以某种载体或支持介质作为样品中蛋白质的泳动跑道，在一定温度、pH条件下、稳定的静电场中实现对样品中蛋白质的分离，进而进行分析。 ?电泳支持介质必须具有：化学惰性、不干扰大分子的电泳过程，化学稳定性好、均匀、重复性好、电内渗小等特性。 常见凝胶电泳的支持介质： ?聚丙烯酰胺凝胶（polyacrylamide gel, PAG)由丙烯酰胺和交联剂N，N’-甲叉双丙烯酰胺在引发剂和增速剂的作用下，聚合而成。未交链的单体丙烯酰胺属神经性毒素，并具有致癌作用，实验过程注意尽可能避免中毒。实验过程简单，仪器设备叫贵重，但分辨率很高，重复性强。主要用于蛋白质、酶、小分子核酸等分离分析。 ?琼脂糖凝胶：从琼脂中精制分离出的胶状多糖，其分子结构大部分是由1，3连接的β-D吡喃半乳糖和1,4连接的3,6脱水?-D吡喃半乳糖交替形成。试剂昂贵，方法简单，分辨率较高。主要用于DNA分离分析。 ?淀粉凝胶：1～5%淀粉凝胶作为载体可对一定分子量的蛋白质进行有效分离。成本低，简单。主要用于同工