遗传代谢性疾病的基因诊断教案.pptVIP

第十九章 遗传代谢性疾病  的基因诊断 ;一、代谢性疾病的分类 ;二、代谢性疾病的诊断手段 ;基因诊断的概念 ;基因诊断的特点 ;;一、DNA测序技术 ;双脱氧链终止法 ; 返回节 ;示例：BigDye? Terminators 循环测序反应扩增到未端为BigDye? Terminators的一系列的核苷酸链。 循环测序反应产物经沉淀、洗涤和纯化，从而去除多余的未反应的BigDye? Terminators。 电泳与结果分析。; 返回节 ;焦磷酸测序技术 ; 返回节 ; 基本流程：第1步 一个特异性的测序引物和单链DNA模板结合，然后加入酶混合物(包括DNA Polymerase、ATP Sulfurylase、Luciferase和三磷酸腺苷双磷酸酶Apyrase)和底物混合物(包括腺苷酰硫酸APS和Luciferin)。; 基本流程：第2步 向反应体系中加入1种dNTP，如果它刚好能和DNA模板的下一个碱基配对，则会在DNA 聚合酶的作用下，添加到测序引物的3’末端，同时释放出一个分子的焦磷酸(PPi)。; 基本流程：第3步 在ATP硫酸化酶的作用下，生成的PPi可以和APS结合形成ATP；在荧光素酶的催化下，生成的ATP又可以和荧光素结合形成氧化荧光素，同时产生可见光。通过CCD光学系统