细胞与亚细胞结构地分离.docVIP

细胞与亚细胞结构的分离Separation of Cells Organelles 生物学及医学研究一般涉及： 整体、器官、组织、细胞、细胞器及分子水平。 其中，细胞、细胞器及分子水平的研究，均需分离细胞或细胞器。 一、从动物组织游离细胞 一)步骤 二)方法 1、非酶法 2、酶法 二、细胞器的游离 三、细胞与细胞器的分离 一)沉降法纯化细胞或细胞器 1、差速离心 2、密度梯度沉降 1)速度沉降 2)等密度沉降平衡 二)电泳法分离细胞 三)亲和吸附法分离细胞 四)根据细胞的生物学特性分离细胞 五)流式细胞术分离细胞 一、从动物组织游离细胞 细胞的微环境 cell-------------------cell----------extracellular matrix(ECM) 细胞连接(如连接蛋白) 细胞粘附(ECM-R介导) 细胞粘合(CAM介导) 媒介：二价阳离子(尤其是Ca2+，如桥粒的中央层)；大分子(如糖蛋白和蛋白聚糖) 不同组织具有不同的细胞间质成分，不同组织中，参与细胞粘合与细胞连接的大分子成分也各不相同，所以，在游离细胞时，不同组织的细胞对不同试剂和不同方法具有不同的敏感性。------游离技术复杂，游离方法多样。 有时，同一种组织可用不同的方法游离出单个细胞，但所获得的细胞在表面性质、激素反应状态及物质和能量代谢上可能各有