幽门螺杆菌新毒素Tip-α对IL-8、TNF-α、IL-β表达的影响.docVIP

幽门螺杆菌新毒素Tip-α对IL-8、TNF-α、IL-1β表达的影响 陈王凯　郝波　 张国新 施瑞华?基金项目：江苏省高校自然科学研究 ?基金项目：江苏省高校自然科学研究项目（项目批准号：08KJ3320003） 作者单位：210029 南京医科大学第一附属医院消化科 通讯作者：程文芳，chengwenfang@ 【摘要】目的 研究幽门螺杆菌（H.pylori，HP）毒素Tip-α(肿瘤坏死因子α诱导蛋白)对细胞因子IL-8、TNF-α、IL-1β表达的影响及其意义。方法 从HP的26695菌株扩增位于H.pylori0596的Tip-α基因，重组载体转化至大肠杆菌表达并纯化Tip-α蛋白，用Western blot方法进行鉴定。以不同浓度的Tip-α作用于胃上皮细胞（GES-1），用ELISA方法检测不同时间点GES-1细胞中细胞因子IL-8、TNF-α、IL-1β表达变化。以PDTC(四氢吡咯烷，NF-κB特异性的抑制剂)阻断NF-κB信号通路后，检测Tip-α作用GES-1后IL-8、TNF-α、IL-1β的表达变化。结果 用Western blot检测纯化蛋白，抗Tip-α抗体可与纯化蛋白特异性结合。Tip-α刺激细胞后细胞因子IL-8、TNF-α、IL-1β的表达水平较刺激前明显升高，刺激前后差别具有统计学意义(P0.05)。PDTC作用后，再给予Tip-α刺激细胞