合成盐酸普鲁卡的纯度检查.pptVIP

合成盐酸普鲁卡因的纯度检查 谢岑 杨优 沈红霞 魏丽丽 李新 黄鹏 刘守志 袁敏莉 田野 王成 钱钟书 戴伟东 * 盐酸普鲁卡因化学名为4-氨基苯甲酸-2-(二乙氨基)乙酯盐酸盐，属于芳酸酯类局麻药。 麻醉强度强，毒性小约、穿透力强、作用迅速、持久，临床上用于浸润麻醉，硬膜外麻醉和阻滞麻醉。 药物介绍 * 杂质来源之一， 酯化不完全的对硝基苯甲酸经还原产生PABA procaine水解产生PABA 药化合成路线 直接酯化法 合成过程原料残留，反应进行不充分，生成各种杂质 主要杂质——对氨基苯甲酸 * * 盐酸普鲁卡因水溶液不稳定，PH值及温度是影响水解的主要因素。 * 测定方法介绍 薄层色谱法——2005版药典 HPLC法——文献 * 薄层色谱法 薄层板：羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶H 薄层板 展开剂：苯-冰醋酸-丙酮-甲醇（14:1:1:4） 显色剂：对二甲氨基苯甲醛溶液 限度： 检测盐酸普鲁卡因中的PABA的限 度不得超过1.2% * 重现性好 分离度好 快速 准确 灵敏 HPLC法 文献一 1 文献二 2 文献三 3 该法可以同时对盐酸普鲁卡因合成品中主成分盐酸普鲁卡因和杂质对氨基苯甲酸含量进行测定，以峰面积计算PABA含量 * 文献一 色谱柱： Thermo Hypersil Cl8 （4.6mm ×250mm，5m）； 流动相： 水-乙腈-三乙胺（85:1:0.02）， 用冰乙酸调节pH 3.9； 检测波长：UV286 nm； 流速： 1ml/min； 进样体积：20μl。 条件选择依据 盐酸普鲁卡因水溶液不稳定，pH值6或遇高温易水解，故选择流动相的pH值为3.9。 由于制剂中要求含对氨基苯甲酸的量小于1.2％，即与盐酸普鲁卡因相比较含量相差较大，为提高对氨基苯甲酸的响应信号，满足准确度、灵敏度的要求，故选择PABA的最大吸收波长286 nm为检测波长。 在该色谱条件下，对氨基苯甲酸和盐酸普鲁卡因达到良好分离的保留时间为：7.02和8.85 min。 * 色谱柱： Luna 5μ C18柱 流动相： 甲醇 -缓冲液（23:77） （0.05mol/L磷酸二氢钾， pH3.0，0.1%庚烷磺酸钠） 检测波长：UV287 nm； 流速： 1.5ml/min； 进样体积：20μl。 柱温： 35℃ * 文献二 条件选择依据 流动相选择：经试验，采用多种比例的甲醇-水作为流动相，结果PABA与普鲁卡因的分离度不好，采用离子对试剂，峰形及分离度得到改善。 该条件下，盐酸普鲁卡因与PABA的分离度满意，PABA出峰时间约2.7min，普鲁卡因约10min。 * * 色谱柱： Nova-Pak Cl8 （150mm×4.0 mm，4m） 流动相： 甲醇-10mmol/L NaH2PO4溶液 （pH 6.48，2mmol/L 三乙胺） （30:70，V/V） 检测波长：UV287 nm； 流速： 0.7 ml/min 柱温： 30℃ 进样量： 10μl 文献三 条件选择依据 流动相中采用NaH2PO4 缓冲液，使峰型和分离度较好，加入一定量三乙胺使原来峰型拖尾现象得到改善，并用磷酸调节pH 6.48，可以更好保护柱子。 该条件下，PABA出峰时间约 2.7min，普鲁卡因10min，PABA与普鲁卡因的分离度符合要求。 * 色谱柱 流动相 流速 检测波长 Thermo Hypersil Cl8 （4.6mm ×250mm，5m） 水-乙腈-三乙胺（85:1:0.02）， 用冰乙酸调节pH 3.9 1 ml/min UV286 Luna 5μ C18柱 甲醇 -缓冲液（0.05mol/L磷酸二氢钾，pH3.0，0.1%庚烷磺酸钠）（23:77） 1.5 ml/min UV287 Nova-Pak Cl8（150mm×4.0 mm，4m） 甲醇-10mmol/L NaH2PO4溶液（pH 6.48，2mmol/L 三乙胺）（30:70） 0.7 ml/min UV287 Agilent Eclipse XDB-C18（4.6×150mm 5μm） 甲醇-15mmol/L NaH2PO4（0.1%三乙胺、醋酸调pH至3.31）（30：70，V/V） 1 ml/min UV287 * 总结 采