1.1DNA重组的技术工具.pptVIP

* 怎样培养出具有抗虫性状的抗虫棉呢？ 基因工程概念 基因工程又叫基因拼接技术或DNA重组技术。（原理：基因重组）通俗的讲就是按照人们的意愿，把一种基因提取出来，加以修饰改造，通过体外DNA重组和转基因等技术，转入另一生物细胞内，定向的改造生物的遗传性状。 创造出人类需要的新的_________和 _________ 结　果 剪切→_____→_____→表达 基本过程 ____________ 操作水平 _____ 操作对象 生物体外 操作环境 ____________ 基因工程的别名 DNA重组技术 基因 拼接 导入 生物类型 生物产品 DNA分子水平 抗虫棉的培育 苏云金杆菌 毒蛋白 杀死害虫 毒蛋白基因 棉花植株细胞内 基因工程概念 基因工程又叫基因拼接技术或DNA重组技术。（原理：基因重组）通俗的讲就是按照人们的意愿，把一种基因提取出来，加以修饰改造，通过体外DNA重组和转基因等技术，转入另一生物细胞内，定向的改造生物的遗传性状。 1.1 DNA重组技术的基本工具 基本工具： （1）准确切割DNA的工具——（“分子手术刀”） ——限制酶 （2）DNA片段的连接工具——（“分子缝合针”） ——DNA连接酶 （3）基因转移工具——（“分子运输车”） ——运载体 特点：一种限制酶只能识别DNA的特定核苷酸序列，并在特定位点切割DNA。 “分子手术刀” ——限制性核酸内切酶 限制酶 限制酶到底切的是什么呢？ 磷酸二酯键 切割DNA分子两个脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键 切割DNA分子后形成了什么？ 粘性末端（在中轴线两侧切割DNA) 平末端（在中轴线处切割DNA) 两种不同生物的DNA，用同种限制酶切割，那么会出现什么现象呢 G A A T T C C T T A A G G A A T T C C T T A A G G C T T A A A A T T C G G C T T A A A A T T C G 用同种限制酶切割 出现相同的黏性末端(或者说是互补配对的粘性末端） 不同生物的DNA片段会不会结合呢？ G C T T A A A A T T C G G C T T A A A A T T C G G C T T A A A A T T C G 这两个缺口如何缝合呢？ 陆丰龙山中学 2、DNA连接酶－“分子缝合针” DNA连接酶连接什么呢？？ 将两个DNA片段“缝合”起来，恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键。 磷酸二酯键 DNA连接酶 DNA连接酶的种类 E.coliDNA连接酶:黏性末端（大肠杆菌中分离） T4DNA连接酶:黏性末端和平末端（T4噬菌体中分离） DNA连接酶与DNA聚合酶是一回事吗？ A G T A C A A A T G C G A C G G T T A T T A DNA聚合酶 A G T A C A A A T G C G C G G T T A T T A T DNA聚合酶 A G T A C A A A T G G C G G T T A T T A T C DNA聚合酶 A G T A C A A A T G G C G G T T A T T A T C DNA DNA聚合酶 具有连接单链DNA的本领（形成DNA的一条链） 相同点 区别2 区别1 DNA连接酶 DNA聚合酶 DNA连接酶与DNA聚合酶是一回事吗?为什么? 1)只能将单个核苷酸连接到已有的核酸片段上，形成磷酸二酯键 形成磷酸二酯键 1)在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键 2)以一条DNA链为模板，将单个核苷酸通过磷酸二酯键连接成一条互补的DNA链 2)将DNA双链上的两个缺口同时连接起来，不需要模板 3、基因进入受体细胞的载体－运载体 1、作用：将目的基因送入受体细胞 2、种类： 质粒、 λ噬菌体衍生物、动植物病毒 3、作为运载体的条件 （1）、能自我复制 （2）、具有一个或多个限制酶切点 （3）、具有遗传标记基因 （4）、对受体细胞无害 常用的载体：质粒 复制起始的一段序列 有切割位点 有标记基因的存在，可用含氨苄青霉素的培养基鉴别 质粒存在于许多细菌以及酵母菌等生物细胞中。是一种裸露的、结构简单、独立于细菌拟核DNA或细胞核之外自我复制的很小的双链环状D