GB/T 9695.27-1991肉与肉制品　维生素B1含量测定.pdf

中华人民共和 国国家标准 肉与肉制品 维生素Bl含量测定 GB/T 9695.27一91 MeatandmeatproductsMethodfor determinationofvitamin81content 1 主肠内容与适用范围 本标准规定了肉与肉制品中维生素B，含量的测定方法。 本标准适用于肉与肉制品中维生素B:含量的测定。 2 引用标准 GB9695.19 肉与肉制品 取样方法 3 原理 试样用酸水解使维生素B,(硫胺素)游离，维生素B:经酶解、纯化后在碱性高铁氰化钾作用下定量 氧化成具有蓝色荧光的硫色素。在激发波长365nm，发射波长435nm处测定其荧光强度，荧光强度与 硫色素含量成正比，以此计算维生素B，的含量。 4 试剂 所用试剂均为分析纯，水为蒸馏水或同等纯度的水. 4.1 乙酸钠(GB694):2mol/L溶液。 4.2 盐酸(GB622):0.1mot/L溶液。 4.3澳甲酚绿pH指示剂:变色范围:pH值为4.0(绿),-5.8(蓝)d0.1g指示剂与。05mol/L氢氧化钠 溶液2.8MI,在玛瑙乳钵中研磨溶解，以水稀至200mLo 4.4 澳酚蓝pH指示剂:变色范围:pH值为3.0(黄)-4.6(蓝)。。1g指示剂与。.05mol/L氢氧化钠溶 液3ml,在玛瑙乳钵中研磨溶解，以水稀至250mLo 4.5 高峰淀粉酶:10%溶液 4.6 氯化钾(GB646):25%溶液. 4.1酸性氯化钾湘夜:每升氯化钾溶液中加入8.5mL浓盐酸。 4.8氢氧化钠(GB629):15Yo溶液。 4.9 铁氰化钾(GB644):1%溶液。 4.10氧化剂:100铁氮化钾溶液1mL,用15/0n氢氧化钠溶液稀释至100L。临用前配制。 4.11异丁醇。 4.12 95%乙醉(GB679)c20%溶液。 4.13酸性乙醇,20%乙醇溶液用。1mot/L盐酸溶液调节pH为3.4-4.3 4.14 人造沸石:市售品要经活化处理 活化方法:将粒度40.60目的人造沸石置于烧杯中，加约5倍量的热水搅拌，静鬓后倾出上清液 接着加入5倍量的3%乙酸溶液搅拌浸泡10min,静置后倾去上清 弃去。重复此操作 直至上清液透明。 国家技术监督局1991一03一26批准 1991一12一01实施 GB/T 9695.27一91 液，重复此操作3次。然后加入约5倍量热的酸性抓化钾溶液，在沸水浴中加热25min，弃去L清液，加 3%乙酸溶液洗涤两次后，用水反复洗至无抓离子为止(用硝酸银溶液检查)。将处理过的人造沸石浸没 于水中保存，也可于80℃干燥备用。维生素B,回收率要大于85%e 4.15维生素B，标准溶液 4.15.1标准贮备液100ug/mL, 称取50.0mg维生素B，标准品于500mL棕色容量瓶中，用酸性乙醇稀释至刻度，置冰箱保存。 4.15.2 标准工作液 10;ig/mL; 取标准贮备液10.OmL，用酸性乙醉定容至100mL棣色容量瓶中。 5仪器和设备 5.1实验室常规设备; 5.2 纹肉机:孔径不超过4mm; 5.3培养箱:可控制温度45^-500C; 5.4棕色具塞试管;25-40mL; 5.5 荧光分光光度计; 5.6 人造沸石玻瑞层析柱:构造如图1, 层析柱可控制流速为1mL/min,准备方法:将脱脂棉置于毛细管顶端防止沸石流出和控制溶液流 速。把悬浮于水中的人造沸石倾入层析柱中，其高度约10cm(约用1.5g人造沸石)仔细洗下贮液槽壁 上的人造沸石顺拉。在吸附过程中液面要始终高于沸石表面，防止柱内有气泡。 单位:mm 20 贮液槽 一 吸附管