牛血清的病毒安全检测跟病毒灭活工艺.pptVIP

DNA病毒－－牛痘病毒 假牛痘病毒: 引起牛乳房和乳头增生性病变、挤奶工皮肤丘疹。 牛丘疹性口炎病毒 引起牛口腔粘膜、鼻镜、鼻孔上皮溃疡，人的手、臂丘疹。 牛源制品应该检测病毒。 能用细胞感染检测，也可用PCR检测。 RNA病毒－－口蹄疫病毒 口蹄疫病毒（FMDV）：无囊膜，20nm，人兽共患，最重要。 能用细胞感染检测，也可用PCR检测。 RNA病毒－－牛病毒性腹泻病毒 牛腹泻病毒（BVDV）：有囊膜，70nm，牛群中普遍存在，倍受关注。 能用细胞感染检测，也可用PCR检测。 RNA病毒－－牛轮状病毒 牛轮状病毒：无囊膜，80nm，牛群中普遍存在，对人和牛的危害不大。 能用细胞感染、ELISA等检测，也可用PCR检测。 RNA病毒－－牛呼肠孤病毒 呼肠孤病毒：无囊膜，80nm，牛群中普遍存在，对人和牛的危害不大。 能用细胞感染、ELISA等检测，也可用PCR检测。 RNA病毒－－牛反转录病毒 与生物安全性相关的牛反转录病毒有两种 牛白血病病毒（BLV） 牛免疫缺陷病病毒（BIV） RNA病毒－－牛白血病病毒 牛白血病病毒（BLV）：有囊膜，100nm，牛群中普遍存在。 未发现对人的感染性，可用PCR检测。 RNA病毒－－牛免疫缺陷病病毒 牛免疫缺陷病病毒（BIV）：有囊膜，120nm，国内牛群阳性率2.32％，对人和牛的危害不大。用蛋白印迹法检测，也可用PCR检测。 朊病毒 朊病毒引起的人和动物的疾病 ? 多种动物和人的亚急性海绵样脑病与羊痒疫因子有关 人的库鲁病(Kuru)、克-雅氏病(Creutzfeldt-Jakob disease)、 阿耳茨海默病(Alzheimer disease)、格-史氏综合征(Gerstmann-Straussler syndrome) 羊的痒疫(Scrapie)，水貂传染性脑病(Transmissible mink encephalopathy)，黑尾鹿和糜鹿的慢性消耗病(Chronic wasting disease of mule deer and elk)，牛海绵状脑病(Bovine spongiform encephalpopathy)以及某些公园动物的相关感染症。 朊病毒 Prusiner 1982: the plaque protein is the infectious agent (prion) The normal, non-infectious Protein (PrPC) is encoded by the host and is mainly expressed on lymphocytes and neurons The infectious prion protein (PrPSc) has the same amino acid composition, but is resistant to proteases and tends to polymerize 朊病毒 朊病毒 very slow rapid rapid PrPC PrPSc PrPC PrPSc Seeding model (nucleated crystallization) Refolding model (template directed) 朊病毒 牛血清的重要性与生物药品的病毒安全性 牛的病原与病毒安全性关注的重点 欧盟对牛血清病毒检测的要求 病毒分类与牛的某些病毒 牛血清的病毒安全检测技术 血清的病毒清除/灭活工艺 病毒安全实验室的部分研究工作 细胞培养 抗体检测 抗原检测 核酸检测 牛血清的病毒安全检测技术 细胞培养 主要检测血清中是否存在可致敏感细胞病变的病毒，一般要求至少使用2种细胞，其中1种细胞为牛源细胞。 牛血清的病毒安全检测技术 抗体检测 主要检测血清中某些病毒的抗体，预示牛群曾经感染病毒或接种过疫苗，普遍要求BVDV抗体为必检项目 牛血清的病毒安全检测技术 抗原检测 主要检测血清中某些病毒蛋白的存在，预示血清来源的牛群近期感染或潜在感染了某种病毒，如BVDV、BTV、腺病毒、狂犬病病毒等，常用的方法是ELISA、免疫荧光技术等 牛血清的病毒安全检测技术 核酸检测 主要检测血清中某些病毒核酸的存在，预示血清来源的牛群近期感染或潜在感染了某种病毒，如BVDV、FMDV、BTV、细小病毒等，常用的方法是PCR、RT-PCR、荧光定量PCR等。 牛血清的病毒安全检测技术 朊病毒的构象依赖性免疫测定 构象依赖性免疫测定方法（conformation-dependent immunoassay, CDI） 能检出微量的prion蛋白，5 h即可出结果。 可检测出8株prion，其中包括分别导致绵羊痒病、鹿的慢性消耗性疾病和疯牛病的各株prion。