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第一章 提取与沉淀分离技术 生物物质，尤其是生物大分子物质：蛋白质（包括 酶），核酸，脂类，糖类等生物大分子的制备分 四个阶段： 1. 选择材料和预处理 2. 细胞的破碎及细胞组分的分离 3. 提取和纯化 4. 浓缩，干燥和保存 1 生物大分子物质及其性质 1. 生物材料的组成极其复杂，常常包含有数百种乃至几 千种化合物。 2. 许多生物大分子在生物材料中的含量极微，分离纯化 的步骤繁多，流程长。 3. 许多生物大分子一旦离开了生物体内的环境时就极易 失活，因此分离过程中如何防止其失活，就是生物大 分子提取制备最困难之处。 4. 生物大分子的制备几乎都是在溶液中进行的，温度、 pH值、离子强度等各种参数对溶液中各种组成的综合 影响，很难准确估计和判断 2 生物材料的选择 动物，植物，微生物都可作为制备生物大分子的原材 料，所选用的材料主要依据试验目的来确定。 有效成份是指欲纯化的某种单一的生命大分子物质。 而有效成分以外的其它物质则统称杂质。 3 在动、植物和微生物材料中，有效成分的含量一般较少； 稳定性较差，大多数对酸、碱、高温和高浓度有机溶剂等 因子较敏感；易被微生物分解变质。 材料的采集会大大影响实验的成败,选用的材料不同，有 效成分的含量就不同；同一材料的部位或生长期不同，有 效成分的含量也不尽相同。 总的来说，材料选择应遵循的原则是，有效成分含量多、 稳定性好；来源丰富、保持新鲜；提取工艺简单、有综合 利用价值等。 4 红豆杉皮中的紫杉醇含量也仅为干重的 0.005％～0.007％。据推算, 每生产1 kg 紫杉醇,需16.67吨树皮,需采剥1500～2000 棵大树。 红豆杉属不同种植物紫杉醇含量差异较大： 其中云南红豆杉和东北红豆杉的紫杉醇含量 最高。 5 世界大多数地区青蒿的青蒿素含量都较低，一般在 0.2% 以下。 青蒿在中国较常见，南北各地均有，主要分布在广东、 广西、贵州、云南、四川、重庆等地，青蒿素含量由 南到北逐渐降低，在南方含量一般为0.6 ~0.8% 。 广东含量在0.8~1.3%之间，最高可达1.7%。 6 采集部位对青蒿素含量的影响 黄花蒿植株中含有青蒿素的部位有叶片、幼茎、花蕾、花和种子,不 同部位中青蒿素含量不同,从高到低依次为花蕾、叶片、茎枝和种子, 叶片、花和花序,叶和花、嫩枝、茎秆,在其植株主茎和枝条上的叶片 中,青蒿素含量均呈下部、中部、上部依次递增的分布规律,花期的青 蒿素含量最高,青蒿素在花序中的含量比叶中高4～11倍。 采收期对青蒿素含量的影响 采收期对黄花蒿产量及青蒿素含量都有明显影响。随着植物生长期的 变化,黄花蒿中青蒿素的含量有着明显的差异,花蕾期植株中青蒿素含 量最高,为最佳采收期。青蒿根部不含青蒿素,茎中含量也很低,在 0.01%以下。主要是叶片含量较高。但叶片不同时期其青蒿素含量是 不同的。如5月至6月份叶中青蒿素含量为0.23% - 0.37% , 7月至10 月上旬含量为0.5% - 0.72%,其中8月底到9月上旬含量达高峰值0.69% - 0.92%。