基于移动窗F检验法中药配方颗粒混合均匀度近红外分析研究.docVIP

基于移动窗F检验法中药配方颗粒混合均匀度近红外分析研究 　　[摘要] 混合均匀度是保证中药配方颗粒产品批内质量一致性的关键。该文以乌梅配方颗粒中乌梅提取物粉末糊精体系（糊精比例10%）为研究对象，在其混合过程中设计多个取样位点，将采集的粉末样品进行近红外（near infrared，NIR）漫反射光谱分析，并结合移动窗F检验（moving window F test，MWF test）法对混合过程均匀度进行判断。同时采用HPLC对混合过程中枸橼酸的含量变化进行分析，以验证MWF test法的有效性。结果显示乌梅配方颗粒混合过程在200～300 r达到混匀状态，300～400 r出现脱混现象，400 r后又趋于稳定，移动窗F检验分析结果与HPLC分析结果基本一致。移动窗F检验算法通过F界值设定均匀度判别阈值，避免了常规移动窗标准偏差法中阈值设定的随机性和模糊性，可推广应用于其他中药粉末混合过程的在线监控。 　　[关键词] 中药配方颗粒； 混合均匀度； 近红外； 移动窗F检验法； 过程分析技术 　　混合过程是中药配方颗粒制备工艺的关键环节之一。受中药饮片质量波动的影响，单味中药饮片经提取、浓缩、干燥成粉末后，收率存在一定差异，须加入适量辅料调节总量，以确保临床应用剂量的一致性[1]。中药提取物粉末与辅料混合的均匀度，是保证配方颗粒批内质量一致性的关键。目前，中药配方颗粒的混合过程尚缺乏有效的混合均匀度决策工具，主要通过停机取样，采用离线检测手段对主要成分含量差异度进行分析，效率较低。 　　近红外（near infrared，NIR）光谱技术凭借其快速、无损、绿色等诸多优势在制药混合过程中应用广泛[24]。NIR光谱技术应用于药物粉末混合过程监控需结合化学计量学方法对过程数据进行解析，可分为定性和定量分析方法两类[5]。定量分析方法如偏最小二乘法[6]、偏最小二乘判别分析[7]等，其准确性依赖于所建立的定量模型，在日常使用中，需不断对模型进行更新和维护。定性方法包括移动块标准偏差法[8]，谱间差异法[9]，欧氏距离/马氏距离法[10]以及基于质量源于设计理念所建立的混合过程终点设计空间的判断方法[11]等。本研究创新性的采用NIR光谱技术结合移动窗F检验（moving window F test，MWF test）算法对中药配方颗粒混合过程进行分析监控，并以离线HPLC分析结果对该法的有效性进行了验证。 　　1 材料 　　Antaris傅里叶变换近红外光谱仪（美国Thermo Nicolet公司），Agilent 1100高效液相色谱仪（美国Agilent公司），HTD350型柱式料斗混合机（武汉恒达昌机械设备有限公司），81030A1100型粉末末端取样器（昆山莱曼设备有限公司）。 　　乌梅提取物粉末和辅料糊精均由北京康仁堂药业有限公司提供，枸橼酸对照品（中国食品药品检定研究院，批号100396201302）；甲醇（色谱级，美国Fisher公司），乙醇（分析级，北京化工厂），纯净水（杭州娃哈哈集团有限公司）。 　　2 方法 　　2.1 样品制备 　　将15.80 kg乌梅提取物粉末和1.54 kg糊精先后置于75 L柱式混合机料斗中，填料系数约为66%，混合机转速设置为14 r?min-1。停机取样方案：0 r停机取样；1～150 r，间隔5 r停机取样；151～250 r，间隔10 r停机取样；251～430 r，间隔15 r停机取样。模拟混合时间总计约30 min。每次停机均于6个预设取样位点取样，取样位点分布见图1。由于乌梅提取物、糊精的流动性较差，致使停机后粉末床呈现斜坡状态，其中，取样位点1代表粉末床上层，取样位点2和3代表罐体死角，取样位点4和5代表粉末床中层，取样位点6代表粉末床下层和罐体死角。对所取的318个粉末样品进行近红外漫反射光谱扫描。选择乌梅提取物粉末中的指标性成分枸橼酸含量的变化作为混合均匀性的评价指标。0，15，30，40，60，80，100，120，135，150，190，210，280，310，370，430 r时停机采集的96个粉末样品进行枸橼酸含量测定。粉末样品经液相分析，若6个取样位点之间枸橼酸含量的RSD小于5%，即认为已经混合均匀[12]。 　　2.2 NIR 光谱采集 　　采用Antaris傅里叶变换近红外光谱仪，以空气做背景，采用积分球漫反射模式以旋转样品杯法采集光谱，分辨率为8 cm-1，光谱扫描范围1万～4 000 cm-1，增益为2，每份样品扫描16次后取平均值。 　　2.3 HPLC分析 　　2.3.1 样品制备 取收集到的粉末样品0.1 g，精密称定，置于具塞锥形瓶中，精密加入25 mL水溶解，称重，超声提取30 min，加水补足失重，静置滤过，