GB/T 19371.2-2003饲料中液态蛋氨酸羟基类似物的测定　高效液相色谱法.pdf

ICS 65 120 B 46 中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准 GB/T 19371.2-2003 饲料中液态蛋氨酸轻基类似物的测定 高效液相色谱法 Determinationofliquidmethioninehydroxyanalogueinfeeds- Highperformanceliquidchromatography 2003-11一10发布 2004-05-01实施 中 华 人 民 共 和 国 发 布 国家 质 量 监 督 检 验 检 疫 总 局 GB/T19371.2- 2003 月U 舀 本标准由国家质量监督检验检疫总局提出。 本标准由全国饲料工业标准化技术委员会归口。 本标准由国家饲料质量监督检验中心(北京)负责起草，诺伟思国际营养有限公司参加起草。 本标准主要起草人:闺惠文、赵小阳、王彤、杨文军、张秉范。 GB/T19371.2-2003 饲料中液态蛋氨酸轻基类似物的测定 高效液相色谱法 范围 本标准规定了高效液相色谱法(HPLC)测定配合饲料及浓缩饲料中液态蛋氨酸轻基类似物的 方法 。 本标准最低检出量为 1Aog 2 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有 的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准 GB/T6682 分析实验室用水规格和试验方法 GB/T 14699.1 饲料采样方法 原理 用 10%的乙睛水溶液提取样品中的液态蛋氨酸经基类似物，用氢氧化钾将蛋氨酸轻基类似物水解 为有活性的单体，磷酸调节水解液的PH值。反相高效液相色谱分离，紫外检测器210nm处测定。 4 试荆和溶液 以下所用的试剂，除特别注明外均为优级纯试剂，水符合GB/T6682一级用水的规定。 4.1 乙睛:色谱纯。 4.2 提取剂:10%乙睛水溶液 4.3 氢氧化钾溶液:500g/L. 4.4 磷酸溶液:1十1(V+V). 4,5 HPLC流动相:0.05%三氟乙酸水溶液 4.6 液态蛋氨酸轻基类似物标准样品:除非购买标有准确含量的标样，否则需准确测定含量。 5 仪器设备 5.1 振荡器:水平方向振荡，频率250r/min-300r/min, 5.2 溶剂过滤系统:全玻璃滤器，孔径 。.2C[mo 5.3 HPLC系统，由下述部件组成: — 泵，无脉冲。 — UV检测器，适合在210nm处测定。 — 保护柱:填有C,a键合硅胶的预柱或性能相当的其他保护柱 — 分析柱:填有粒度为5um键合硅胶的C,。柱或性能相当的其他分析柱。 6 采样 6.1 采样步骤 :按 GB/T 14699.1采集 实验室样品 GB/T19371.2- 2003 6.2 试样的制备:将实验室样品粉碎，全部通过 。.45mm筛，充分混匀，贮于磨口瓶中备用。 分析步骤 注意:液态蛋氨酸轻基类似物PH较低，操作时应避免接触皮肤，如不慎接触皮肤，立即用水清洗。 7.1 参比样品的制备 为了检验分析的准确性，每次分析(尤其是初次测定)均应进行参比样品的测定。 参照以下步骤制备不同浓度的参比样品 注:添加用液态蛋氨酸轻基类似物要准确测定含量，混合样品可以用家庭用食品搅拌机，确保样品混合均匀。称量 样品时，准确至小数点后两位。 空白样品是指确保没有加人液态蛋氨酸经基类似物的饲料样品。 7.1.1 5.0%参比