GB/T 17817-1999饲料中维生素A的测定　高效液相色谱法.pdf

GB/e17817-1999 前 言 饲料中维生素A的测定目前尚无国际标准，本标准是在参照瑞士罗氏药品化学有限公司维生素研 究部发表的饲《料中维生素和类胡萝 卜素— 现代分析方法))’用高效液相色谱法测定配合饲料、预混合 饲料和浓缩维生素中维生素A”而制定的。在技术内容上参照该法，在编写格式上依据GB/丁1.1 1993《标准化工作导则 第1单元:标准的起草与表述规则 第1部分:标准编写的基本规定》和 GB/T1.4--1988标《准化工作导则 化学分析方法标准编写规定》。 为了使饲料中维生素A测定方法科学、准确、经济、实用，适合于我国不同实验室大量饲料样品的 测定，在参照国外分析方法的基础上增加了反相色谱测定条件。 本标准由全国饲料工业标准化技术委员会提出并归口。 本标准由国家饲料质量监督检验中心(北京)负责起草。 本标准主要起草人:陈必芳、赵小阳、李俊玲。 中华人 民共和 国国家标准 饲料中维生素A的测定 高效液相色谱法 GB/T17817-1999 DeterminationofvitaminA infeeds- High-pressureliquidchromatography 1 范围 本标准规定了饲料中维生素A的测定— 高效液相色谱法。 本标准适用于配合饲料、浓缩饲料、复合预混料和维生素预混料中维生素A的测定。测量范围为每 千克样品中含维生素A在1OOOIU以上。 2 引用标准 F列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时，所示版本均 为有效 所有标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。 GB/T6682-1992分析实验室用水规格和试验方法 3 方法原理 用碱溶液皂化试验样品，乙醚提取未皂化的化合物，燕发乙醚并将残渣落解于正己烷中，将正己烷 提取物注入用硅胶填充的高效液相色谱柱，用紫外检测器测定，外标法计算维生素A含量。 4 试荆和材料 除特殊注明外，本标准所用试剂均为分析纯，水为蒸馏水，色谱用水为去离子水，符合GB/T6682 中用水规定。 4门 无水乙醚(无过氧化物)。 4门 1过氧化物检查方法:用5mL乙醚加1mL10%碘化钾溶液，振摇1min，如有过氧化物则放出游 离碘，水层呈黄色。若加。.5%淀粉指示液，水层呈蓝色。该乙醚需处理后使用。 4.1.2 去除过氧化物的方法:乙醚用5%硫代硫酸钠溶液振摇，静置，分取乙醚层，再用蒸馏水振摇洗 涤两次，重蒸，弃去首尾5%部分，收集馏出的乙醚，再检查过氧化物，应符合规定。 4.2 乙醇。 4.3 正己烷:重蒸馏(或光谱纯)。 4.4 异丙醇:重燕馏。 4.5 甲醇 :优级纯 4.6 2.6一二叔丁基对甲酚(BHT) 4.7 无水硫酸钠。 4.8氢氧化钾溶液500g/I。 国家质2技术监督局1999一08一10批准 2000一02-01实施 Gs/T17817-1999 4.9 抗坏血酸乙醇溶液5g/I_:取0.5g抗坏血酸结晶纯品溶解于4mL温热的蒸馏水中，用乙醇稀释 至100ml，临用前配制。 4.10 维生素A标准溶液 4.10门 维生素A标准贮备液:准确称取维生素A乙酸酷油剂(每克含1.00X106IU)0.1000g或结晶 纯品。.0344g(符合中国药典)于皂化瓶中，按分析步骤(7-1)皂化和提取，将乙醚提取液全部浓缩蒸发 至干，用正己烷溶解残渣置入100mL棕色容量瓶中并稀释至刻度，混匀，4C保存。该贮备液浓度为每 毫升含1ooolu维生素A, 4.10.2 维生素A标准工作液:准确吸取1.00mL维生素A标准贮备液((4.10.1)，用正己烷(4.3)稀 释10。倍;若用反相色谱测定，将1.00mL维生素A标准贮备液置人10ml棕色小容量瓶中，用氮气吹 干，用甲醇(4.5)溶解并稀释至刻度，混匀，再按 1:10比例稀释。该标准工作液浓度为每毫升含lOIU 维生素Aa 4.11酚酞指示剂乙醇溶液10g/Lo 4.12 氮气99.9 。 5 仪器、设备 5 1 实验