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部分发酵产品产工艺及培养基配方
部分发酵产品生产工艺及培养基配方
我国1958年才开始赤霉素的研究、生产和推广应用,并于1969年因为党的“九大召开及国庆20周年,故把赤霉素称之为 九二O”.2 5n m’发酵罐工业化生产试验2.1 试验材料与方法 2.1.1 菌种:G—l142.1.2 试验地点:湖南生物制药厂.2.1.3 培养基① 种子培养基(w/w):葡萄糖1.5,糊精1.0,花生粉1.5,MgSO4·7HzO 0.1,KH2PO4 0.1,消泡剂0.2,自来水配制,自然pH值,6m3种子罐中投料3m3 ,实罐消毒121℃ ,30分钟,冷却至28℃待接种。② 发酵培养基(w/w):玉米淀粉7.0,饴糖2.5;豆饼粉0.3,花生粉1.0,MgSO4·7H2O 0.07,KH2PO4 0.14;消沫剂0.05, a一淀粉酶0.05,50m3发酵罐投料40m3。pH值自然,实罐消毒121C,30分钟,冷却至28℃后接入种子培养液.2,1.4 发酵设备;种子罐6 m3,二档搅拌. 发酵罐体积50m3。,三档搅拌. 流加罐用另一种子罐代替.2.1.5 发酵条件种子罐:培养温度28℃ 士I℃ ,通风量l:I v/v,罐压0.4—0.5 kg/cm2.发酵罐:培养温度28士l℃ ,通风量l:0.7 v/v,罐压0.1—0.15 kg/cm2.
赤霉素发酵参考环境:10~60吨罐,搅拌转速115转/分,通风量1:1/分, 培养温度大多采用29℃~32℃ 。培养基的起始pH值控制在5.5左右,而将发酵过程的pH值维持在3.5~4.5之间为宜。种子培养基:葡萄糖0.3g,蒸馏水lOOml。豆饼粉 1.5g,淀粉1.Og,葡萄糖1.Og,KH2PO4 0.lg,(NH4)2SO4 0.05g,MgSO4 0.1g,自来水lOOml。发酵培养基:豆饼粉0.9%.淀粉7.0%,葡萄糖1.0%,KH2PO4 0.15%,MgSO40.08%,a-淀粉酶0.003%,pH 5~5.5发酵周期130小时阿维菌素:种子培养基( g/L):淀粉30,豆饼粉20,酵母粉2.0,CoCl2·6H20 0.0005,pH 7.0~7.2。发酵培养基(g/L):淀粉50,玉米粉l0,酵母粉l0,豆饼粉10.CaCO3 2.0,CoCl2·6HaO0.0005,pH 7.0~ 7.2。
妥布霉素发酵培养基:黄豆饼粉2.5;葡萄糖1.O; 玉米粉1.O; 玉米淀粉1.5;(NH4)2SO4 0.5;鱼粉O.4;MgS04 0.6; 油1.0;ZnSO4 0.05;CaCO3 0.6;温度37℃,发酵时间112h左右。发酵菌种采用黑暗链霉菌。
洛伐他汀培养基:淀粉,黄豆饼粉,葡萄糖,玉米浆,K2HPO4,(NH4)2S04,CaCO3,发酵菌种采用红曲菌株,M.ruber。发酵周期10天。
甾体激素氢化可的松菌种:蓝色犁头霉(As365),培养基(%) 葡萄糖1.O,酵母膏0.23,玉米浆1.5,硫酸铵0.5;pH值6.4~6.5;m1),28℃ 培养24h,投入0.25%的RSA(发酵底物醋酯化合物:17a一羟基孕甾一4一烯一3,2O一二酮一21一醋酸酯,RSA),然后转化36~42h。
综上所述,在利用整肠生菌(Bacillus Licheniformis)等杆菌发酵生产杆菌肽中,由于前期微生物生长繁殖迅速,碳源消耗量较大。在发酵中后期的碳源主要用于杆菌肽次级代谢产物的合成,故碳耗较平稳。所以碳源不宜过多,2%~3%为宜。同时杆菌肽生产与其它抗菌素生长碳源不同,实验表明,加入3%柠檬酸作为碳源最佳,以保证菌体迅速生长。如果中后期碳浓度过高,会引起菌体生长太快,而减少杆菌肽合成。所以,对碳源种类的选择和控制至关重要,在选择适合种类碳源的条件下,碳源量的控制方法可采用碳比消耗速率、菌体比生长速率和控制流加碳源速度。同时,由于过量磷酸盐对杆菌肽前体氨基酸形成有抑制作用,从而干扰杆菌肽的合成。所以,无机磷酸浓度应控制在0.1~1.0 mmol/L,以便既能满足菌体生长需要又不影响杆菌肽的合成。此外用整肠生菌发酵生产杆菌肽,发酵pH为7.5,发酵时间为40 h为宜。杆菌肽是利用整肠生菌发酵pH为7.5,发酵时间为40 h杆菌肽发酵参考环境:5~100吨罐,搅拌转速100转/分,通风量1:1/分,罐压0.7公斤, pH 7.5左右,培养基主要成分为液化淀粉,豆粕,柠檬酸,各种无机盐适量,发酵菌种采用整肠生菌,发酵周期40小时。
井岗霉素属氨基环醇类抗生素,是一种抗水稻纹枯病的农用抗生素,具有药效高,无毒副作用,持效时间长的特点,是一种重要的农用抗生素。井岗霉素产生菌是在我国井岗山地区土壤中分离出的吸水链霉菌的一个变种,定名为吸水链霉菌井岗变种(Steptomyces H
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