20DNA的复制和修复幻灯片.pptVIP

核酸一章内容复习提问？ 问题：DNA双螺旋模型是谁在哪年提出来的？ 核酸一章内容复习提问？ 问题：DNA双螺旋模型是谁在哪年提出来的？ 核酸一章内容复习提问？ 问题：DNA双螺旋模型是谁在哪年提出来的？ 20.1 DNA的生物合成（复制） 1.1 机制——半保留复制 半保留复制  1953年，Watson和Crick在提出DNA双螺旋结构模型时就推测DNA可能按照半保留机制进行自我复制。 1958年，Meselson和Stahl用15N标记E.coli. DNA，证明了DNA的复制是半保留复制。 线状DNA的双向和单向复制 1.3 DNA聚合反应有关的酶 1.底物 ： dNTP(dATP,dGTP,dCTP,dTTP） DNA聚合酶催化的链延长反应 原核生物：以大肠杆菌为例 DNA-polⅠ：与校读，修复有关 5′→ 3′聚合酶功能：但持续合成DNA的能力差。 5′→ 3′外切酶活性：双链有效。推测该酶主要是 对DNA损伤的修复，以及在DNA复制时RNA引 物切除及其缺口的填补。 3′→ 5′外切活性：此活性只作用于生长中不配对 的（错配）的单链，校对功能。 聚合反应机理： 5′→ 3′聚合反应的特点： (1) 以单链DNA为模板 (2) 以dNTP为原料 (3) 引物提供3′-OH (4) 聚合方向为5′→3′ 核酸外切酶活性 (二) DNA聚合酶的种类 1. 原核生物的DNA聚合酶 DNA-pol III: 由10种亚基（αβγθτδδ’χΨε）组成的不对称聚合体 是原核生物复制延长中真正起催化作用的酶。 催化效率最高。 （三）DNA连接酶（DNA ligase） 连接DNA链3?-OH末端和相邻DNA链5?-P 末端，形成磷酸二酯键，从而把两段相邻的DNA链连接成完整的链。反应需要ATP。 1.6 DNA复制的过程 一 、复制的起始 １辨认起点（DnaA蛋白） ２解开双链（DnaB蛋白--解螺旋酶） ３生成引物（DnaG蛋白—引物酶） 二、复制的延长 DNA聚合酶Ⅲ 由其β亚单位辨认引物，新链的第一个脱氧核苷酸与引物的3`-OH形成磷酸二酯键，开始复制。 三 、复制的终止 1、复制有终止点ter 2、去掉引物（ polⅠ 5′→ 3′外切酶活性） 3、填补缺口（ polⅠ聚合活性） 4、连接切口（ DNA连接酶） 复制的忠实性 真核生物DNA聚合酶 DNA-pol ? 复制中延长随从链 DNA-pol ? 没有其他pol时才起作用 DNA-pol ? 催化线粒体DNA的复制 DNA-pol ? 复制中延长领头链 DNA-pol ? 校读、修复和填补缺口 真核细胞DNA复制的特点 　 1、DNA复制时不需要下列哪一种酶： 　　A．DNA指导的DNA聚合酶 　　B ．RNA指导的DNA聚合酶 　　C ．DNA指导的RNA聚合酶 　　D．连接酶 　　E．拓扑异构酶 2、关于DNA聚合酶Ⅲ，错误的是： 　A．是复制酶 　B.有5’ →3’聚合活性 C. 有3’→5’外切活性 D. 催化引物生成 3、关于DNA复制，下列哪项是错误的： A、真核细胞DNA有多个复制起始点 B、为半保留复制 C、亲代DNA双链都可作为模板 D、子代DNA的合成都是连续进行的 E、子代与亲代DNA分子核苷酸序列完全相同4、冈崎片段是指： A、模板上的一段DNA B、在领头链上合成的DNA片段 C、在随从链上由引物引导合成的不连续的DNA片段 D、除去RNA引物后修补的DNA片段 E、指互补于RNA引物的那一段DNA 20.2 DNA的损伤与修复 2.1 引发损伤的因素、机理及其后果 （一）直接修复 紫外光照射可使相邻的两个T 形成二聚体； 光修复酶可使二聚体解聚为单体状态，DNA完全恢复正常。光修复酶的激活需300-600μm波长的光。 （二）切除修复 参与的酶有: 核酸内切酶，polⅠ　,DNA连接酶 （三）　重组修复（复制同时的修复） 重组蛋白RecA，polⅠ，连接酶参与　　（ 损伤会保留下去） 20