血常规检查及镜检1-1幻灯片.pptVIP

血常规检查与镜检 温州医学院附属第二医院 李向阳 今日议题 血常规检查的内容 血球分析仪的发展历程 镜检的意义 血球分析仪存在的问题及解决方案 血常规检查的内容 血红蛋白测定 各种细胞计数及比例 各种细胞的形态学变化 血液中其它物质和生物体 各种细胞的形态学 各种细胞的形态学 各种细胞的形态学 血球计数仪的发展史 590 年荷兰人米德尔堡和詹森设计制造了最原始的显微镜 1610年伽利略使用望远镜观察小的物体并将其放大，后来被列文霍克改进成为原始的显微镜。 1658 年意大利人马尔皮基应用最原始的显微镜首先观察到了红细胞，他是第一个见到红细胞的人 开始进行红细胞计数则是200 年后的事情了 而设计并生产出第一台血细胞计数仪则又过了近100 年。 1852 年就有人开始设计对红细胞的计数办法 1855 年发明了用于计数血细胞的计数板 目前仍然使用的改良Neubauer 计数板就是应用最为广泛和持续时间最为长久的经典一种，仍然是最为可靠和最为经典的计数技术 它不仅适用于血细胞计数，还可用于其他细胞、动物血细胞、微小粒子及需要在显微镜下计数的各种样品。 直到Paul Ehrlich通过用苯胺染料(aniline dyes)对血细胞进行染色，可以区分细胞核、细胞浆以及一些完好的细胞结构 把各种不同的白色的细胞（white cells）划分为五种类型，也就是今天仍然沿用的分类标准。 1912年出生在美国阿肯色州一个小城的人Wallance H. Coulter发现了微小粒子通过特殊的小孔时可产生电阻变化这一现象，并根据这种电阻变化特点将其应用于微小粒子的粒度测量和计数上。科技界为表彰他的发明，将其称为库尔特原理（Coulterprinciple ）。 Coulter 先生将其引入到血液细胞计数上，在1953年获得美国发明专利 细胞分类 　仪器将体积为35～450fL的血细胞，分为256个通道（channel）。每个通道：1.64fl。根据细胞大小，分别置于不同的通道中，显示血细胞体积分布直方图(Histogram)。 ?经溶血素处理脱水后，血细胞体积大小发生了变化！！！ 第一群（35～90fl）小细胞区：淋巴细胞（体积最小）。 第二群（90～160fl）单个核细胞区，（中间细胞）：单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、原始、幼稚细胞、异常细胞等。 第三群（160fl以上）大细胞区：嗜中性粒细胞（体积最大）。 经过半个多世纪的发展，这种仪器已经有了非常明显的进步。以前因为只能进行细胞计数，因此我们一般将这类仪器叫做血细胞计数仪（Blood Cell Counter）,由于技术的进步目前这类仪器可以提供除了血细胞计数以外的更多参数的联合测定和分析，因此我们一般将这类仪器统称为血液细胞分析仪(Hematology Analyzer) 。 光散射法血液分析仪检测原理 组合应用 电学 光学 细胞化学等 血细胞分类方法 采用VCS技术进行五分类的仪器 采用采用阻抗、激光散射和荧光染色技术 激光散射和细胞化学染色技术 多角度偏振光散射法应用于白细胞五分类（MAPSS技术） 采用图像分析的单纯细胞分类仪 VCS技术 V代表体积测量法，可有效区分体积大小差异显著的淋巴细胞和单核细胞。 C代表高频电导性。细胞核的化学组份可使电流的传导性产生变化，其变化量可以反映出细胞内含物的信息。可区分体积相近而内部性质不同的细胞群体，如淋巴细胞和嗜碱性粒细胞 S代表激光散射测量技术，激光束可穿透细胞，探测细胞内核分叶状况和胞浆中的颗粒情况，以区分出颗粒特性不同的细胞群体。例如细胞内颗粒粗的要比颗粒细的散射光更强，因此可以用于区分粒细胞中的嗜中性、嗜酸性和嗜碱性三种细胞。 阻抗、激光散射和荧光染色技术 白细胞分析 DIFF通道： STROMATOLYSER-4DL试剂中的表面活性剂可以溶解掉标本中的红细胞和血小板，并在白细胞膜上打出小孔；然后第二种试剂 TROMATOLYSER-4DS中的聚次甲基染料通过这个小孔进入白细胞中，与细胞核的核酸和细胞器结合，在经过波长633nm的激光照射，产生的荧光强度与细胞的核酸含量成正比。STROMATOLYSER -4DL试剂还具有与嗜酸性颗粒特异性结合的能力，可根据侧向散射光信号强度，将嗜酸性粒细胞从中性粒细胞中分离出来。 前向散射光（FSC）信号可反应细胞体积大小；侧向散射光（SSC）信号可反应细胞的颗粒和细胞核等内含物的信息 在DIFF散射图当中可以得到中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、单核细胞、淋巴细胞等四个分群 WBC/BASO通道是专用作检测嗜碱性粒细胞的通道 STROMATOLYSER –FB是一种酸性试剂，可将红细胞和血小板形成淡影化，将除嗜碱性