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第八章 微生物反应动力学 主讲： 许钦坤 电话： E-mail: xuqinkun@163.com QQ: 3932990 办公： B310 主要研究：产物形成与低物利用的关系，即碳源的利用与产物形成速度的关系。 碳源在培养基中主要作为能源物质，但是当缺少细胞的组成成分时，碳源也能作为构成细胞的材料。 发酵类型 第三节 微生物分批培养动力学 分批培养：一次投料，一次接种，一次收获的间歇培养方式。 简单的过程，培养基中接入菌种以后，没有物料的加入和取出，除了空气的通入和排气。整个过程中菌的浓度、营养成分的浓度和产物浓度等参数都随时间变化。 延迟期：少量细菌接种到新鲜培养基后，一般不立即进行繁殖，生长速度近于零。因此在开始一段时间，细菌数几乎保持不变，甚至稍有减少。这段时间被称为延迟期，又称为迟缓期、调整期或滞留适应期。处于延迟期细菌细胞的特点是分裂迟缓、代谢活跃。延迟期的长短与菌种、种龄、接种量和培养基成分有关。 对数期 在对数期，培养基成分虽然发生改变，但是细胞的生长速率维持恒定。当培养基中营养过量时，生长速度与营养物浓度无关。以细胞重量的增加表示生长速度。 稳定期 稳定期阶段，因营养物质耗尽及有害物质的大量积累，细胞的浓度达到最大值，不再增加，此时的细胞比生长速率为0。 减速期 对数期细胞的大量繁殖，培养基中营养物质迅速消耗，有害物质逐渐积累，细胞的比生长速率逐渐下降，进入减速期，培养基中不存在抑制细胞生长的物质时，细胞的比生长速率和限制性基质的浓度有如下关系： μ=μmS/（Ks+S） S：限制性基质浓度 Ks：饱和常数 这个关系式称为Monod方程式，是一个经验公式。有抑制细胞生长的物质存在时，这公式需要变化 。 静止期 在静止期阶段，因营养物质耗尽及有害物质的大量积累，细胞的浓度达到最大值，不再增加，此时的细胞比生长速率为0. 衰亡期 细胞开始死亡，活细胞的浓度不断下降，在工业生产上，通常在对数生长的未期或衰亡期开始以前，结束发酵过程。因此，这个阶段的研究不多。 分批发酵的优缺点 优点：即操作简单，周期短，染菌的机会减少，生产过程和产品质量易掌握。 缺点：存在基质抑制问题，出现二次生长现象。如对基质浓度敏感的产物，或次级代谢物，抗生素，用分批发酵不合适，因其周期较短，一般在1～2天，产率较低，不适于测定动力学数据。 第四节 连续培养动力学 连续培养：又称连续发酵，是在开放系统中进行的，是指以一定的速度向发酵罐内添加新鲜培养基，同时以相同的速度流出培养液，从而使发酵罐内的液量维持恒定，是培养物在进似恒定状态下生长的培养方法。 经连续培养后，流出的培养液进行固液分离，经浓缩后的细胞悬浮液再被送回发酵罐；相当于不断进行接种，可以提高发酵罐中的细胞浓度，也有利于提高连续培养系统的操作稳定性。 连续培养设备的类型 1、均匀混合的生物反应器 在这种反应器中，培养基经搅拌而混合均匀，反应器中的各部分培养基间不存在浓度梯度。这种连续培养装置又可进一步分为恒化器和恒浊器两种。 恒化器：使培养液中的限制性营养物浓度保持恒定。当处于恒定状态时，细胞的生长速度是通过调节微生物需要的营养物质的浓度来控制，工业中主要用来生产微生物菌体 在恒化器中，一方面菌体密度会随时间的增长而增高，另一方面，限制生长因子的浓度又会随时间的增长而降低，两者互相作用的结果，出现微生物的生长速率正好与恒速流入的新鲜培养基流速相平衡。 恒浊器 是根据培养器内微生物的生长密度，并借光电控制系统来控制培养液流速，以取得菌体密度高、生长速度恒定的微生物细胞的连续培养器。在这一系统中，当培养基的流速低于微生物生长速度时，菌体密度增高，这时通过光电控制系统的调节，可促使培养液流速加快，反之亦然，并以此来达到恒密度的目的。因此，这类培养器的工作精度是由光电控制系统的灵敏度来决定的。 在恒浊器中的微生物，始终能以最高生长速率进行生长，并可在允许范围内控制不同的菌体密度。 在生产实践上，为了获得大量菌体或与菌体生长相平行的某些代谢产物如乳酸、乙醇时，都可以利用恒浊器。 一般来说，恒浊器较难控制，目前大多数研究工作者都利用恒化器进行连续培养的研究。 2、活塞流反应器 这是一种不均一的管状反应器，培养基由反应器的一端流入，而从另一端流出。 在这种反应器中，没有返混现象，因而，反应器内的培养基呈极化状态，在其不同的部位，营养物的成分、细胞数目、传质效果、氧供应和生产量都不相同。对于这类反应器，在其入口处，加入物料的同时也必须加入微生物细胞。通常是在反应器的出口处装一支路，使细胞返回，也可以