分子伴侣haperone.pptVIP

分子伴侣 （chaperone ）;目录;Ellis等提出的分子伴侣基本概念：在蛋白质折叠和组装过程中，分子伴侣防止多肽链内或链间因疏水等相互作用表面瞬间暴露而形成错误结构，并且还可以破坏已经形成的错误结构。分子伴侣本身不是折叠或组装产物的一部分。;分子伴侣一般通过控制结合和释放来帮助被结合的多肽在细胞内进行折叠、组装、转运或降解等。它本身不包括控制正确折叠所需的构象信息，而只是阻止非天然多肽链内部的活多肽链间的“不正确”的相互作用，为处于折叠中间态的多肽链提供更多“正确”折叠的机会。分子伴侣由一些进化上非常保守的蛋白质家族组成，广泛分布于各种生物体内。近年来的研究还证实分子伴侣在DNA的复制、转录、细胞骨架功能、细胞内的信号转导等广泛领域发挥着重要的生理作用。;分子伴侣的作用机制;有的分子伴侣具高度专一性，如一些分子内分子伴侣，还有假单胞菌的酯酶，有它自己的“私有分子伴侣”。它是由基因limA编码的，与酯酶的基因lipA只隔三个碱基，可能是进化过程中发生的基因分裂造成的。而一般的分子伴侣识别特异性不高，现在只能说分子伴侣识别非天然构象。由于在天然分子中，疏水残基多半位于分子的内部而形成疏水核心，去折叠后就有一部分能暴露出来，或者在新生肽段的折叠过程中，会暂时形成疏水表面，因而认为分子伴侣最有可能是与疏水表面相结合。;近来关于识别机制的研究有较大的进展。BiP(Binding protein,Hsp70家族)是内质网管腔内的分子伴侣，用一种亲和淘选（affinity panning）的方法检查BiP与随机序列生成的十二肽结合的特异性，结果发现，Hy-（W/Y）-Hy-X-Hy-X-Hy区与BiP结合最强，Hy最多的是Trp色氨酸、Leu亮氨酸、Phe苯丙氨酸,即较大的疏水残基。一般来说，2-4个疏水残基就足够进行结合，还有一种比较普遍的说法是分子伴侣能识别所谓的熔球体。 ;另一方面，分子伴侣本身与肽结合部分的结构分析最近也有些进展。例如，PapD的晶体结构表面，多肽结合在它的β-sheet区；GroEL中，约40kDa的153-531结构域是核苷酸的结合区。;分子伴侣作用的第二步是与靶蛋白形成复合物。非常盛行的一种模型认为分子伴侣常常以多聚合体形式而形成中心空洞的结构，用电子显微镜已经观察到由双层的圆面包圈形组成的十四体GroEL分子和一个单层圆面包圈的七体GroEL分子协同作用形成中空的非对称笼形结构，推测靶蛋白可以在与周围环境隔离的中间空腔内，不受干扰的进一步折叠。;不久前发现如果去除GroEL的一个亚基，甚至在其N-端去除78个氨基酸残基的50kDa片段，已经不能在组装成十四体结构后，仍具有确定的分子伴侣功能。由此可以推测，环状分子伴侣并非每个部位都是有效的结合部分，而是只有在若干部位进行有效的结合，而其余部位起识别作用。;就像一个探测器一样，整个十四体GroEL分子以圈层或笼状结构“包裹”在多肽链的主链上，以旋进方式在多肽链的链体上运动。一旦环状多聚体的某一识别部位发现疏水结构或所谓的熔球体结构等新生肽链折叠过程中暂时暴露的错误结构，经信号转导，多聚体的结合部位便与之结合，生成复合物，抑制不正确的折叠。;分子伴侣的分类及分布;分子伴侣在蛋白质合成中的作用;1.分子伴侣参与生物机体的应激反应;2.分子伴侣在蛋白折叠中的作用;3.分子伴侣参与生物大分子的转运和定位;Hsp家族能结合胞液中未折叠的蛋白，并帮助其输入到线粒体和叶绿体中。如在线粒体一些蛋白质的转运过程中，分子伴侣能解开细胞质内前体蛋白折叠的结构域，并牵拉多肽链穿膜而过，水解ATP所释放的能量用以帮助解折叠及跨膜完成后蛋白质与分子伴侣复合物的分离。线粒体基质Hsp70（mHsp70）可与已进入线粒体腔的前导肽交联，一旦前体蛋白进入线粒体腔，立即有一分子的mHsp70结合上去，这样就防止导肽退回细胞质。随着肽链进一步伸入线粒体腔，肽链会结合更多的mHsp70分子，mHsp70可拖拽肽链，mHsp70以一种高能构象结合前导肽转变为低能构象，促使前导肽进入线粒体腔，并迫使后面的肽链解链进入转运孔道。另外，在网格蛋白包被小泡形成过程中也需要分子伴侣协助。 ;4.DNA分子伴侣;分子伴侣对淀粉样蛋白沉积疾病的作用;分子伴侣Hsp90的结构与功能;Hsp90参与调节特定底物蛋白的折叠，它的底物蛋白在折叠的最后阶段以一种近乎天然状态与分子伴侣相互作用。此外，Hsp90在压力条件下还能提高热变性蛋白复性的速率。在体外，Hsp90作为分子伴侣阻止酪蛋白激酶Ⅱ和特定变性蛋白例如柠檬酸合成酶的聚集，Hsp90也能够将变性底物例如β-半乳糖苷酶、二氢叶酸还原酶和萤光素酶维持在折叠活性状态。;与Hsp70不同，Hsp90不是与未折叠多肽链发生相互作用，而是能与特定信号因子结合。hsp90