气相、高效液色谱法简介.ppt

一、色谱法 色谱法：又称色层法或层析法，是一种物理化学分析方法。 它利用不同溶质（样品）与固定相和流动相之间的作用力（分配、吸附、离子交换等）的差别，当两相做相对移动时，各溶质在两相间进行多次平衡，使各溶质达到相互分离。 叶绿体色素纸层析分离实验 （纸色谱） 1906年，俄国植物学家 茨威特分离植物叶绿体中 色素而得名，玻璃管中装 CaCO3,石油醚溶解植物 叶绿体倒入管内，再用石 油醚做淋洗剂，结果，柱 子中被分成几个不同颜色 的谱带。 二、柱色谱 　柱色谱（Column chromatography)为向玻璃管中填入固定相，以流动相溶剂浸润后在上方倒入待分离的溶液，再滴加流动相，因为待分离物质对固定相的吸附力不同，吸附力大的固着不动或移动缓慢，吸附力小的被流动相溶剂洗下来随流动相向下流动，从而实现分离。  三、色谱法的分类方法很多，最粗的分类是根据流动相的状态将色谱法分成四大类。 色谱法按流动相种类的分类：  四、 气相色谱法（GC法） （一）原理 气相色谱法是采用气体作为流动相的一种色谱法。 此法中，载气（是不与被测物质作用，用来载送试样的惰性气体。如氢、氮气）。载着被分离的试样通过色谱柱中的固定相，使试样各组分分离，然后检测。 流动相——气体（由载气带着物料气体） 一般用高压气瓶供给（N2、He ) 固定相 固体 ——固体吸附剂 液体——担体 + 固定液 担体：是一种化学惰性的多孔性固体颗粒。它的作用是提供一个大的惰性表面，用于承担固定液，使固定液以液蜡的状态均匀地分布在其表面。 (二）气相色谱流程示意图： （三）气相色谱仪 1、气相色谱仪的主要部件 气相色谱仪可分为气路系统、进样系统、分离系统、检定器、放大记录系 统五个部分。 （1）气路系统：是一个载气连续运行的密闭管路系统。 从气源出来的载气顺次经过减压阀、压力表、净化器、气流调节器、转子流量计、汽化室、色谱柱、检测器，然后放空。 （2）进样系统包括进样装置和汽化室。液体进样用微量注射器，汽化室的作用是将液体或固体样品瞬间汽化为蒸汽。 （3）分离系统：是装在恒温箱内的色谱柱。他是气相色谱中的核心部分。色谱柱中装有固定相。 （4）放大系统：将检测器转换来的微弱电信号放大记录的系统。 （5）检测器：是关键部件。 作用：将经色谱柱分离后的各组分按其特性及含量转换为相应的电信号。 按其测定原理不同分为浓度型检测器和质量型检测器。 3、气相色谱流出曲线有关术语 保留时间——从进样到出现组分浓度极大点 （色谱峰最高点）的时间tR 在一定固定相，一定操作条件下，各组分的 t 值不一样。同一组分有同样的 t 值，可用来作定性分析。此外，峰高（h）、峰面积（A）可用作定量分析。 A = h ×半宽度（峰高一半处色谱峰宽度） A=（底×高）／2 A 值 = 积分仪求得总面积的 94％。 计算 ① （一组分峰面积／94％） （ 总峰面积／94％） ② 以标准曲线来计算含量，以含量为横坐标，峰面积为纵坐标。 层析柱和检测器 1. 检测器有多种 ① 热导池检测器（TCD） 在气相色谱中应用最早、最广泛的检测器。灵敏度为100 ppm。 原理：不同组分和载气有不同的导热系数。当通过热导池的气体组成及浓度发生变化时，可引起热敏元件上温度的变化，由此而产生阻值变化，可衡量组分的含量。 ② 氢火焰离子化检测器（FID） 灵敏度比热导池检测器高1000倍，可在室温至300℃范围内使用。 原理：以H2（燃烧气）和空气（助燃气）的火焰为能源，在氢火焰附近装置两个电极（收集极、发射极），两个电极之间外加100~350V电压，当样品组分从色谱柱馏出后，由载气携带，与H2汇合，从喷嘴流出，与空气相遇，经引燃就燃烧。在氢火焰高温能源作用下，样品组分、电离成正、负离子， 在直流电场的作用下，离子向电极移动产生电流，这微小的电流经放大器放大后输入记录器，得出色谱峰信号。氢焰检测器（与单位时间内进入火焰组分的质量成正比，是典型的质量型检测器））对大多数有机物都很灵敏。但对在氢火焰中不电离的或电离很少的物质如N2、NO、CO、CO2、SO2、NH3、H2O、SiCl4、