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第六章 发酵过程动力学的基本概念 张 海 龙 山东教育学院 生物系 Shan Dong Institute of Education 主要内容： 一、生物反应动力学描述 二、生物反应模式与发酵方法 三、微生物发酵动力学 四、微生物生长代谢过程中的质量平衡 一种是使底物在酶（游离酶或固定化酶）的作用下进行反应，如淀粉的液化、异构糖的生产、无侧链青霉素（6-APA）的制造等。 另一种是通过细胞的培养，利用细胞中的酶系，把培养基中的物质通过复杂的生物反应转化成新的细胞及其代谢产物。 菌体生长速率 比生长速率 二、基质消耗速率 　　 以菌体得率系数为媒介，可确定基质的消耗速率与生长速率之间的关系。 当基质既是能源又是碳源时： 碳源总消耗速率＝用于生长的消耗速率＋用于维持代谢的消耗速率 定义：消耗单位基质量ΔS（每克或每摩尔）与生成的干菌体ΔX（g）之间的比值定义为菌体得率（YX/S）。[消耗1g基质生成细胞的克数] 通常，菌体X以干重表示；基质S是培养液中某一限制性底物。 三、代谢产物的生成速率 (2)类型Ⅲ（非偶联型） 　　 产物的形成与细胞生长不相关或无直接关系，其特点是细胞生长期基本无产物合成，细胞停止生长产物则大量合成。属于这类的产物是次级代谢产物。例如青霉素、链霉素等抗生素发酵。 其动力学方程可表示为： (3)类型Ⅱ（混合型） 　　 产物的形成与细胞生长部分相关或具有间接关系，例如柠檬酸、谷氨酸发酵等。 其动力学方程可表示为： 定义：生成的代谢产物量ΔP对底物的消耗量ΔS（g）之比定义为代谢产物收率（YP/S）。 假如完全没有菌体生成，则理论代谢产物收率可达到最大值。 二、发酵操作方法 定义：每一个分批发酵过程都经历接种，生长繁殖，菌体衰老进而结束发酵，最终提取出产物。 特点：微生物所处的环境是不断变化的，可进行少量多品种的发酵生产，发生杂菌污染能够很容易终止操作，当运转条件发生变化或需要生产新产品时，易改变处理对策，对原料组成要求较粗放等。 （二）、补料分批发酵法 定义：所谓分批补料培养技术，是指在分批培养过程中，间歇或连续的添加新鲜培养基的方法。 特点：与传统分批发酵相比，其优点在于使发酵系统中维持很低的基质浓度。 低基质浓度的优点为：①可以除去快速利用碳源的阻遏效应，并维持适当的菌体浓度，使不致于加剧供氧的矛盾。②避免培养基积累有毒代谢物。 补料分批培养适合于以下条件 ①生长非偶联型产物的生产 ②高密度培养 ③产物合成受代谢物阻遏控制 ④利用营养缺陷型菌株合成产物 ⑤补料分批培养还适用于底物对微生物具有抑制作用等情况。 ⑥此外，如果产物黏度过高或水分蒸发过大使传质受到影响时，可以补加水分降低发酵液黏度或浓度。 补料分批培养的优点 （三）、连续发酵法 所谓连续培养，就是在发酵过程中一边补入新鲜料液，一边以相近的流速放料，维持发酵液原来的体积。 连续发酵优点： ①高效，它简化了装料、灭菌、出料、清洗发酵罐等许多单元操作，从而减少了非生产时间和提高了设备的利用率； ②自控，便于利用各种仪表进行自动控制； ③产品质量较稳定； ④生长与代谢产物形成的两种类型节约了大量动力、人力、水和蒸汽，且使水、汽、电的负荷均匀合理。 连续发酵类型 单罐均匀混合连续发酵 管道非均匀混合连续发酵 塔式非均匀混合连续发酵 第三节、微生物发酵动力学 生物反应动力学是研究生物反应过程中菌体生长、基质消耗、产物生成的动态平衡及其内在规律。 研究内容包括发酵过程菌体生长速率、基质消耗速率和产物生成速率的相互联系，环境因素对三者的影响，以及影响其反应速率的条件。 (1) 停滞期 停滞期是微生物细胞适应新环境的过程。 接种物的生理状态和浓度影响停滞期的长短。 (2)对数生长期 处于对数生长期的微生物细胞的生长速率大大加快，单位时间内细胞的数目或质量的增加维持稳定，并达到最大值。 此时，如以细胞数目或生物质量的对数值对培养时图，将得一直线，该直线的斜率就等于μ。 微生物的最大比生长速率在工业上的意义 为保证工业发酵的正常周期，要尽可能地使微生物的比生长速率接近其最大值。 最大比生长速率不仅与微生物本身的性质有关，也与所消耗的底物以及培养的方式有关。 限制微生物生长代谢的并不是发酵液中营养物质的浓度，而是营养物质进入细胞的速度。 (3)稳定期 在细胞生长代谢过程中，培养基中的底物不断被消耗，一些对微生物生长代谢有害的物质在不断积累。受此影响，微生物的生长速率和比生长速率就会逐渐下降，直至完全停止，这时就进入稳定期。 处于稳定期的生物量增加十分缓慢或基本不变；但微生物细胞的代谢还在旺盛地进行着，细胞的组成物质还在不断变化。 由于细胞的自溶作用，一些新的