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- 2018-09-07 发布于浙江
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实时荧光定量PCR检的数据处理及结果报告
实时荧光定量PCR检测的数据处理及结果报告 卫生部临床检验中心 李金明 基本概念 线性基线期 (Linear base-line phase) 为PCR扩增的四个主要阶段之一(图)。线性基线期为扩增最初的10~15个循环,此时,PCR反应处于起始阶段,扩增产物很少,所产生的荧光信号很低,因此,基线荧光信号可根据此阶段产生的荧光信号来计算。 基本概念 指数期初期 (The beginning of exponential phase) 为PCR扩增的四个主要阶段之一(图)。进入扩增指数期初期,荧光强度达到一个阈值,该阈值通常为基线荧光信号均值标准差的10倍。扩增达到阈值时的循环数可称为CT(ABI Prism有关文献)或CP(LightCycler有关文献)。CT或CP与原始扩增模板数量正负相关,可通其与原始模板的函数关系,来计算原始模板的数量。 基本概念 指数期(Exponential phase) 为PCR扩增的四个主要阶段之一(图)。PCR达到其最大的扩增阶段,理想条件下,每一循环后,PCR产物倍比增加。 基本概念 平台期(Plateau phase) 为PCR扩增的四个主要阶段之一(图5-1)。扩增达到平台期,此时,荧光信号不再随扩增循环数的增加而增加。 基本概念 Ct值(threshold cycle)或CP值(crossing point) Ct或CP值指
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