新版张海森植物组织逆境伤害程度测定.pptVIP

实验步骤简图 取材（各3片叶） 打取叶圆片 9片/管 15ml蒸馏水/管 集中抽气15min 平衡20min 测量S1 煮沸15min冷却冷却 摇匀 测量S2 * * 植物组织逆境伤害程度的测定 ——电导法 （ 实 验 37 ) 教师处理材料（-20oC,20min冷冻材料 ） 学生进入实验室先洗试管 教师将水浴锅及电导率仪打开 农业生物学基础实验教学中心 逆境伤害程度的测定方法： 1 紫外法： 根据渗出物质对紫外的吸收 2 电导法: 测定受损质膜外渗电解质的电导 农业生物学基础实验教学中心 实验原理 植物细胞膜对维持细胞的微环境和正常的代谢起着重要的作用。在正常情况下，细胞膜对物质具有选择透性能力。 逆境：高温、干旱、冻害、冷害、污染、酸雨 当植物受到逆境影响时，细胞膜遭到破坏，膜透性增大，从而使细胞内的电解质外渗，以致植物组织浸入去离子水中，水的电导将因电解质的外渗而加大。 用电导仪测定外液的电导度增加值，求得伤害程度。 农业生物学基础实验教学中心 膜透性增大的程度与逆境胁迫强度有关，也与植物抗逆性的强弱有关。因此，电导法目前已成为作物抗性栽培、育种上鉴定植物抗逆性强弱的一个精确而实用的方法。 农业生物学基础实验教学中心 大叶扶芳藤叶片 实验材料： 农业生物学基础实验教学中心 操作方法 实验处理： 正常植物叶片 冷冻胁迫处理（-20℃），处理20min。 洗刷试管，去离子水中含有吐温20 农业生物学基础实验教学中心 正常、冻害各取3个叶片，用去离子水洗净 每叶片打取叶圆片9个，放到小烧杯中用去离子水冲洗； 每支试管放入9个叶圆片； 加入15ml去离子水； 放入塑料纱网（距液面1-2cm），用去离子水漂洗； 2. 步骤 农业生物学基础实验教学中心 放置到塑料烧杯中（不盖塞子），统一抽气15min。（设置空白1只试管） 农业生物学基础实验教学中心 4.电导仪测定初电导值S1 5.沸水浴15 min（杀死植物组织），自来水冷却，用力摇1-2min后即可测定终电导S2（注意：沸水浴时需将塞子松动一下，以防加热后打不开） 3.抽气后取出纱网，室温摇动20min （时间可以更长） 农业生物学基础实验教学中心 结果计算:（参照课本） 相对电导度（L）= (S1-空白）/ (S2-空白） 冻害的伤害度（％）= Lt－冻害处理的相对电导度 Lck－室温对照的相对电导度 农业生物学基础实验教学中心 -20℃ 室温 平均 重复 平均 重复 伤害度(%) 相对电导度(L) 终电导值(μS) 初电导值(μS) 处理 空白 电导值 实验材料 植物组织逆境伤害程度的测定记载表 农业生物学基础实验教学中心 农业生物学基础实验教学中心 DDS-307型电导率仪操作规程 1、打开电源开关，预热30分钟。 2、仪器校准：将“选择”旋钮指向“检查”档，调节常数补偿旋钮到“1” 刻度线，调节温度补偿旋钮到“25”刻度线，然后调节“校准”旋钮，使仪器显示100.0μS/cm，校正完毕。 按照电极上标明的电极常数，调节常数补偿旋钮，使仪器显示值与电极所标常数一致。 农业生物学基础实验教学中心