专题2课题1微生物实验室培养2017高三一轮.pptVIP

问题讨论 1.为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？ 2.在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？ 答：以免接种环温度太高，杀死菌种。 3.在作第二次以及其后的划线操作时，为什么总是从上一次划线的末端开始划线？ 答：划线后，线条末端细菌的数目比线条起始处要少，每次从上一次划线的末端开始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。 第一次灼烧 每次划线之前灼烧 划线结束灼烧 目的 避免接种环上可能存在的微生物污染培养基 杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种 杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染或感染操作者 （2）稀释涂布平板的操作方法 （二）、分离纯化大肠杆菌 方法： （2）稀释涂布平板的操作方法 （二）、分离纯化大肠杆菌 方法： （二）、分离纯化大肠杆菌 培养、鉴定： 将接种后的培养基和一个未接种的培养基（对照组）都放入到37℃恒温箱中，培养12h和24h后，分别观察并记录结果。 最适pH 细菌：6.5-7.5 放线菌：7.5-8.5 真菌： 5.0-6.0 培养温度和时间 细菌：30-37℃ 1-2d 放线菌：25-28℃ 5-7d 真菌：25-28℃ 3-4d 菌种保存： 接种到固体斜面培养基，菌落长成后置于4℃冰箱保存。 ⑵长期保存： 甘油管藏法 ⑴临时保藏： 1、显微镜直接计数： 利用血球计数板，在显微镜下计算一定容积里样品中微生物的数量。 微生物计数： 不能区分死菌与活菌； 不适于对运动细菌的计数； 需要相对高的细菌浓度； 个体小的细菌在显微镜下难以观察； 缺点 2.间接计数法（活菌计数法） ⑴原理：在稀释度足够高时，微生物在固体培养基上所形成的一个菌落是由一个单细胞繁殖而成的，即一个菌落代表原先的一个单细胞。 ⑵常用方法：稀释涂布平板法。 每克样品中的菌落数＝(C÷V)×M 其中，C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(ml)，M代表稀释倍数。 注意事项 ①为了保证结果准确，一般选择菌落数在30——300的平板上进行计数。 ②为使结果接近真实值可将同一稀释度加到三个或三个以上的平皿中，经涂布，培养计算出菌落平均数。 ③统计的菌落往往比活菌的实际数目低。 答：当两个或多个细菌细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。 ◆如果得到了2个或2个以上菌落数目在30——300的平板，则说明稀释操作比较成功，并能够进行菌落的计数，如果同一稀释倍数的三个重复的菌落数相差较大，表明试验不精确，需要重新实验。 课外延伸 在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂。培养某种细菌后，如果PH升高，指示剂将变红，说明该细菌能够分解尿素。 测定饮水中大肠杆菌数量的方法是将一定体积的水用细菌过滤器过滤后，将滤膜放到 伊红美蓝 培养基上培养，大肠杆菌菌落呈现黑色，通过记述得出水样中大肠杆菌的数量。 为了确定分离得到的是纤维素分解菌，还需要进行_____________实验，纤维素酶的发酵方法有______ 发酵和______ 发酵。纤维素酶测定方法是对纤维素酶分解滤纸等纤维素所产生的________ 含量进行定量测定。 发酵产纤维素酶 液体 固体 葡萄糖 课题延伸 分解纤维素的微生物的分离 纤维素酶 种类、作用、催化活力 刚果红染色 筛选原理 实验设计 土壤取样 选择培养 纯化培养 鉴别培养 前置染色法 后置染色法 富含纤维素土壤 增大分解菌含量 染色鉴别 分离出分解菌 课堂总结 讲完第1点后讲课本P22中间楷体字内容引出2、3、4、内容 专题2 微生物的培养与应用 微生物的分离和培养 （培养基、灭菌、倒平板） 某种微生物的数量测定 培养基对微生物的选择作用 通过本专题的学习，应当掌握培养基、消毒灭菌等有关微生物培养的基础知识，应当掌握培养基的制备、高压蒸汽灭菌和平板划线法等基本操作技术，并可以运用相关技术解决生产生活中有关微生物计数、微生物的分离与培养等实际问题。 一、基础知识——微生物 （一）微生物的类群 微生物 原核类: 真核类 非细胞类： 蓝藻、细菌、放线菌、支原体等 酵母菌、霉菌、食用菌 真菌： 单细胞植物：衣藻 单细胞动物：草履虫 病毒 特点：结构都相当简单，个体多数十分微小。通常要用光学显微镜或电子显微镜才能看到。。 细菌的形态 细菌 单个或者少数微生物在固体培养基表面生长繁殖,可以形成肉眼可见子细胞的群体——菌落 菌落用途：用于微生物纯化、计数、鉴定 菌落 细菌的菌落特征因种而异。 菌落特征是微生物鉴定的重要依据 菌苔：菌落连成片 有些细菌在一定的条件下，细胞里面