重组人血管内皮抑素对兔vx-2移植瘤腘窝淋巴转移干预的实验研究-experimental study on the effect of recombinant human endostatin on lymphatic metastasis of rabbit vx - 2 transplanted tumor in popliteal fossa.docxVIP

4目 录 4 一、主要缩略语英文索引1 二、中文摘要2 三、英文摘要4 四、论文正文 前言7 材料和方法12 结果20 讨论34 结论39 参考文献40 文献综述44 综述参考文献49 成果附录53 致谢54 PAGE PAGE 10 主要缩略语英文索引 缩略词 MVD HEV PNAD 英文全称 microvessel density high endothelial venule pnad peripheral node addressin 中文全称 微血管密度 高内皮小静脉 外周淋巴结地址素 YH-16 VX-2 rh-endostatin，Endostar VX-2 重组人血管内皮抑素 注射液，商品名：恩度 Shope 病毒诱发的兔 乳头状瘤衍生的鳞癌 MLVD microlymphatic vessel density 微淋巴管密度 PBS phosphate buffered saline 磷酸盐缓冲液 HE hematoxylin and eosin 苏木精-伊红 CD31 Anti-CD31， Platelet/endothelial cell adhesion molecule（PECAM-1） 血小板内皮细胞黏附 分子-1 抗体 LYVE-1 lymphatic vessel endothelial HA receptor-1 淋巴管内皮透明质酸 受体-1 VEGF Vascular Endothelial cell Growth Factor 血 管 内 皮 细 胞 生 长 因 子 SP streptavidin-perosidas IR inhibition rate 链霉菌抗生物素蛋白 -过氧化物酶连接法 抑瘤率 重组人血管内皮抑素对兔 VX-2 移植瘤淋巴转移干预的实验研究 目的： 中文摘要 （1）观察重组人血管内皮抑素对兔 VX-2 移植瘤血管及淋巴管生成的影响， 探讨其在兔移植瘤生长及腘窝淋巴结转移中的作用。 （2）通过对兔 VX-2 肌肉移植瘤腘窝淋巴结组织中的新生血管进行微血管密 度（MVD）计数及淋巴结铸型，观察淋巴结组织中微血管的形态及分布特点。 方法： 从南华大学实验动物部提取 12 只新西兰大白兔并在其右后小腿外侧肌肉内 植入兔 VX-2 瘤组织块（1mm3）建立兔 VX-2 肌肉移植瘤模型，1 周后移植瘤长至直 径约 3mm 大小，并随机分成两组，实验组用恩度 0.75mg/Kg 耳缘静脉注射抑制兔 VX-2 肌肉移植瘤生长，对照组用生理盐水耳缘静脉注射进行对照，均持续 2 周， 移植术后每周行 1 次彩超检查测量瘤体大小及瘤体血供变化，描绘肿瘤生长曲线， 计算抑瘤率，用药完成 1 周后放血处死两组新西兰大白兔，取出两组移植瘤组织 及腘窝淋巴结组织进行免疫组化实验，以 CD31 及 LYVE-1 分别标记两组瘤组织中 微血管及微淋巴管并计数，以 CD31 标记两组淋巴结组织中微血管并计数，同时检 测两组瘤组织中 VEGF 的表达情况。 采用注射铸型剂 ABS（红色）经淋巴结入门小动脉之供血动脉进行淋巴结血 管铸型，同时应用淋巴管间接注射技术注射铸型剂 ABS（蓝色）观察淋巴结充盈 情况。铸型完成后将铸型标本进行腐蚀、修剪，冲洗、切片、干燥、导电等处理， 最后扫描电镜下观察和摄相，激光共聚焦下三维重建。 结果： （1） 重组人血管内皮抑素对兔 VX-2 移植瘤腘窝淋巴结转移率有明显抑制作 用（P＜0.05）；对兔 VX-2 移植瘤生长体积及瘤体血供也有明显的抑制作用（P＜ 0.05），抑瘤率 IR 达到了 26.22%-29.09%。 （2）实验组兔 VX-2 移植瘤组织及腘窝淋巴结组织内 MVD 分别比对照组 VX-2 移 植瘤组织及腘窝淋巴结组织内 MVD 低（P＜0.05）。 （3）实验组兔 VX-2 移植瘤组织中 MLVD 比对照组兔 VX-2 移植瘤组织中 MLVD 低（P＜0.05）。 （4）实验组兔 VX-2 移植瘤组织中 VEGF 阳性表达细胞百分数（20.59 ±3.59） 低于对照组兔 VX-2 移植瘤组织中 VEGF 阳性表达细胞百分数（30.10±3.89），并 有统计学意义（P＜0.05）。 （5）对照组 VX-2 移植瘤细胞 VEGF 阳性表达水平与兔 VX-2 移植瘤组织中 MVD 及 MLVD 呈正相关（r=0.89，P =0.000；r=0.79，P =0.001），与其腘窝淋巴结组 织中 MVD 也呈正相关（r=0.87，P =0.001）；实验组 VX-2 移植瘤细胞 VEGF 阳性表 达水平与兔 VX-2 移植瘤组织中 MVD 及 MLVD 呈正相关（r=0.85，P =0.003；r=0.81， P =0.006），与