特异性微小RNA-19a抑制剂对胃癌细胞增殖影响系列.pptVIP

microRNA-19a 胃癌细胞→ microRNA-19a ? 本课题主要研究特异性微小RNA-19a的抑制剂对胃癌细胞增殖的影响，从而为胃癌的治疗提供新的靶点。 初步假设：特异性微小RNA-19a的抑制剂抑制胃癌细胞的增殖。 设计并合成微小RNA-19a的2’-甲氧修饰的RNA寡核苷酸（微小RNA抑制剂），用脂质体转染到SGC-7901和MGC-803胃癌细胞，然后用实时定量逆转录-聚合酶链反应技术检测微小RNA-19a的表达情况，最后用MTT法检测胃癌细胞的增殖情况。 微小RNA的抑制剂由生物公司合成并购买 细胞转染实验以及MTT法技术都已普及 实时定量-PCR基础二楼生化教研室可进行本实验 材料 胃癌细胞SGC-7901和MGC-803（购于上海生化所细胞库） DMEM培养液（4°C保存） 胎牛血清 RNA提取Trizol法试剂 转染Lipofectamine 2000试剂 实时定量逆转录-聚合酶链反应试剂盒 通用逆转录引物 针对微小RNA-19a而设计PCR扩增的引物 微小RNA抑制剂：抑制微小RNA-19a活性的2’-甲氧修饰的RNA寡核苷酸 方法 1、细胞培养 胃癌SGC-7901和MGC-803细胞在37度、含5%CO2的培养箱中培养。DMEM培养液中含有10%小牛血清。选择对数生长期细胞用于实验。 2、细胞转染 转染前1d ,