重组fnc端肝素结合域多肽对人胃癌细胞株sgc-7901转移能力的影响-effect of recombinant fnc heparin binding domain polypeptide on metastasis ability of human gastric cancer cell line sgc - 7901.docxVIP

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重组fnc端肝素结合域多肽对人胃癌细胞株sgc-7901转移能力的影响-effect of recombinant fnc heparin binding domain polypeptide on metastasis ability of human gastric cancer cell line sgc - 7901

福建医科大学硕士学位论文 福建医科大学硕士学位论文 目 录 英汉缩略语名称对照 1 中文摘要 2 英文摘要 4 前言 6 材料和方法 8 结果 21 讨论 31 总结 35 参考文献 36 综述 41 致谢 54 英文缩略语名称对照 英文缩写 BSA 英文全称 Albumin from bovine serum 中文全称 牛血清白蛋白 FN fibronectin 纤维连接蛋白 PBS phosphate buffer solution 磷酸盐缓冲液 OD optical density 光密度 MMPs matrixmetalloproteinase 基质金属蛋白酶 SDS sodium dodecyl sulfate 十二烷基硫酸钠 EMT epithelial-mesenchymal transition 上皮间质转化 ECM extracellular martrix 细胞外基质 rhFNHC36 fibronectin C—terminal heparin—binding site polypeptide 重组纤维连接蛋白 C 端肝素结合域多肽 DMSO dimethyl sulfoxide 二甲亚砜 PAGE Polyacrylamide gel electrophoresis 聚丙烯酰胺凝胶电泳 HCL Hydrochloric acid 盐酸 NS Normal Sodium 生理盐水 rpm revolutions per minute 转/分 mg milligram 毫克 Tris Tris-hydroxymethyl aminomadthane 三(羟甲基)胺基甲烷 重组 FN C 端肝素结合域多肽对人胃癌细胞株 SGC-7901 转移能力的影响 摘要 目的:研究重组人纤维连接蛋白 C 端肝素结合域多肽( rhFNHC36)对人胃癌细 胞 SGC-7901 体内外迁移转移能力的影响,初步探讨其可能涉及的机制。 方法:1、通过结晶紫法检测 rhFNHC36 对人胃癌细胞株 SGC-7901 粘附能力 的影响;2、通过 Transwell 小室检测 rhFNHC36 对人胃癌细胞 SGC-7901 迁移侵袭 能力的影响;3、通过 Westernblot 测定 rhFNHC36 对人胃癌细胞株 SGC-7901 相关 整合素 αV、β1、β3 及上皮间质转化相关蛋白 E-cadherin、Vimentin 表达量的影响; 4、通过明胶酶谱法测定 rhFNHC36 对人胃癌细胞株 SGC-7901 基质金属酶 9 活性 的影响;5、通过荧光素酶标记的人胃癌细胞株 SGC-7901 血行转移模型[1]观察 rhFNHC36 对细胞裸鼠体内转移能力的影响。 结果:1、rhFNHC36 不同浓度组(100μg/ml、200μg/ml、400μg/ml)的 SGC-7901 细胞的基质胶粘附率分别为 81.04 ??1.50%、74.77 ??1.20%、68.62 ??2.37%,明显低 于对照组(假定粘附率为 100%),差别具有统计学意义(P0.01);rhFNHC36 不 同浓度组(100μg/ml、200μg/ml、400μg/ml)的 SGC-7901 细胞对 FN 粘附率分别 为 80.63 ??5.22%、79.00 ??2.26%、73.38 ??2.02%,与对照组相比(假定粘附率为 100%),中、高剂量组有统计学意义(P0.05)。 2、rhFNHC36 不同浓度组(100μg/ml、200μg/ml、400μg/ml)的 SGC-7901 细 胞迁移数[单位:个]分别为 77 ??15、65 ??15、35 ??6,与对照组(130 ??7)相比, 差别有统计学意义(P0.01);rhFNHC36 各组细胞侵袭数分别为 24 ??4、17 ??4、 12 ??5,与对照组(48 ??9)相比,差别有统计学意义(P0.05)。 3、、rhFNHC36 不同浓度组(100μg/ml、200μg/ml、400μg/ml)的 SGC-7901 细胞的整合素 αV 的表达分别为 0.54 ??0.14、0.45 ??0.16、0.31 ??0.08,明显低于对照 组 0.94 ??0.07(P0.01);且整合素 β1 的表达分别为 0.38 ??0.13、0.35 ??0.11、 0.35 ??0.12,低于对照组 0.79 ??0.03(P0.01);而各组的整合素蛋白 β3、E-cadherin、 Vimentin 的表达均无明显变化。 4、rhFNHC36 不同浓度组(100μg/ml、200μg/ml、400μg/ml)的 SGC-7901

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