FnCBD64基因重组腺病毒载体Ad.FnCBD64构建资料.docVIP

FnCBD64基因重组腺病毒载体Ad.FnCBD64构建的实验研究 徐瑞剑 王志强 包头市九原区医院胸外科 内蒙古包头 014060 内蒙古自治区自然科学基金项目 项目编号2009MS1148 通讯作者：王志强 Xu ruijian Wang zhiqiang Department of Thoracic Surgery, Jiuyuan District Hospital of Baotou, Baotou Inner Mongolia 01406 实验目的：构建纤维连接蛋白羧基端细胞结合域（FnCBD64）基因重组人腺病毒载体（Ad.FnCBD64）。实验方法：1.FnCBD64重组腺病毒粘粒载体的构建。2.293细胞和Hela细胞的培养。3.磷酸钙转染。4. 筛选和扩增FnCBD64基因重组腺病毒。5．设计公共PCR引物。6. 鉴定Ad. FnCBD64重组腺病毒。7. 浓缩纯化重组腺病毒。8. 测定病毒滴度（50％组织培养感染量TCID50）。9.体外安全性研究。结果：成功构建了纤维连接蛋白羧基端细胞结合域（FnCBD64）基因重组腺病毒载体Ad.FnCBD64。结论：本实验成功地构建了携带人FnCBD64基因的重组腺病毒，为应用FnCBD64促进骨髓间质干细胞的黏附力提供了转染载体，使应用骨髓间质干细胞体外构建组织工程心脏瓣膜成为可能。 运用基因转染的技术加强及