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⊙维生素A ⊙维生素B1 ⊙维生素C ⊙维生素E ⊙ 维生素A 性质 溶解性 易溶于三氯甲烷、乙醚等,微溶于乙醇,不溶水; 不稳定性 不饱和键,易氧化; 紫外吸收特性 325~328nm最大吸收; 与三氯化锑呈色 鉴别 含量测定Vit A含量表示 I.U.(international Unit) 国际单位 效价(I.U./g) 按WHO规定 VA acetate VA alcohol 效价(I.U./g) 2.907×106 3.33×106 1g pure VA acetate≈ 2.907×106 I.U. 紫外分光度法(三点校正法) 在三个波长处分别测定吸收度,根据校正公式计算吸收度A校正值后,再计算含量。 测定原理 杂质的吸收在310~340nm波长范围内呈一条直线 物质对光的吸收具有加和性 第一法 测定VA acetate →环己烷为溶剂 Vit A UV法校正公式 第一法 A328(校正)=3.25(2A328- A316 -A340) Cl- 反应 生成沉淀反应 分子结构中含有杂环,易与生物碱沉淀剂 (碘化铋钾、碘化汞钾、苦酮酸等),硅钨酸等 作用形成组成恒定的沉淀 维生素B1在碱性加热条件下反应放出H2S,与Pb(Ac)2试液形成黑色PbS↓ 含量测定 Assay 紫外分光度法 ⊙维生素C( Vit C) 鉴别 含量测定 *碘量法 ⊙维生素E( Vit E) 固定液:5% SE30柱 温:255±10℃检测器:FID内 标:十六酸十六醇酯 生育酚 乙酰化 酚羟基 维生素E 强还原性 天然品 右旋体 生物效价 右旋体:消旋体 = 1.4 : 10 合成品 消旋体 手性C * * * * 名 称 R1 R2 生物活性 α-生育酚 β-生育酚 γ-生育酚 δ-生育酚 CH3 CH3 H H CH3 H CH3 H 1.0 0.5 0.2 0.1 √ 一、鉴别试验 1. 硝酸反应 △ 橙红色 2. 三氯化铁-联吡啶反应 生育醌 + Fe2+ 联吡啶 血红色 Fe3+ 二、生育酚的检查 硫酸铈滴定液(0.01mol/L) 生育酚 + 2Ce4+ →2Ce3+ + 对-生育醌 原理 二苯胺(亮黄→灰紫) (反应摩尔比1 : 2) * * * * 第九章 维生素类药物的分析 维生素是维持人体机体正常代谢功能所必需的一类活性物质。 Vit A 醇 VA 醋酸酯 VA 棕榈酸酯 9 1 2 3 4 5 6 7 8 共轭多烯醇侧链环己烯 环己烯 共轭多 烯侧链 多异构体 UV 易被氧化 结构分析 三氯化锑反应 ChP(2000) 溶剂 无水无醇氯仿 CHCl3 蓝色 紫红色 → A λ2 λ1 λ3 nm Vit A sample pure VA acetate impurities ⊕如果 λmax为326~329nm; -规定值≤±0.02 则不需要校正 ⊕如果 λmax为326~329nm; -规定值>0.02 则需校正 第二法 测定维生素A醇 第一法未通过,包括: λmax不在326~329nm,必须经皂化: 酯 乙醚提取VA醇,洗涤,过滤 溶于异丙醇 A λ2 λ1 λ3 nm A λ2 λ1 λ3 nm Vit A sample pure VA acetate impurities 校正公式由来 第二法 A325(校正)=6.815A325-2.555A310-4.260A334 ⊙维生素B1( Vit B1) 氨基嘧啶环-CH2-噻唑环(季铵碱) UV 氨基嘧啶环 噻唑环 结构分析 还原性 碱性 与酸成盐 与生物碱↓→↓ 非水碱量法 结构分析 荧光消失 正丁醇 蓝色荧光 H+ OH- 硫色素反应 ChP(2000) 鉴别试验 非水溶液滴定法 硫色素荧光法 6 1 2 3 4 5 维生素C结构性质 二烯醇 强还原性 弱酸性 手性C UV 己糖结构 强还原性 2,6-二氯靛酚 褪色 玫瑰红 ↓红 ↓黑 *2,6-二氯靛酚法 R1 R2 ﹡ ﹡ Vit E (dl-α-Tocopheryl Acetate)
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