CELLCYCLE第十三章细胞周期-细胞生物学在线.ppt

CELL CYCLE;细胞增殖是生命的基本特征。 初生婴儿1012个细胞，成人1014个，约200种类型。 成人每秒钟有数百万新细胞产生。 一个大肠杆菌若按20分钟分裂一次，并保持这一速度，则两天即可超过地球的重量。;第一节什么是细胞周期 ;Eucaryotic Cell Cycle ;根据细胞周期可将高等动物细胞分为3类： ①连续分裂细胞，如表皮生发层、骨髓干细胞。 ②休眠细胞，称G0期细胞。 ③不分裂细胞，又称终端细胞，如神经、肌肉、多形核细胞等。;一、细胞分裂的类型;Amitosis ;Mitosis ;Prophase;Two centrosomes, and their forming radial arrays of astral microtubules separating on the surface of an early prophase newt lung cell nucleus. ;图片来自;Microtubules and Motors in the spindle;Premetaphase;Metaphase;Anaphase;Anaphase A and B;Telophase;Cytokinesis ;Dividing Muscle Myoblast (SEM x8,000);Telophase in plant cells;Meiosis ;synaptonemal complex;Meiosis in mouse spermatogenesis ;Zygotic meiosis;Gametic meiosis;Sporic meiosis;Chromosome recombination 1;Chromosome recombination 2;二、细胞周期时间的测定;T;三、细胞同步化;（二）人工同步化;2. 诱导同步化 1）DNA合成阻断法：用DNA合成抑制剂，可逆阻断细胞周期，然后释放。常用TDR双阻断法。 优点：同步化程度高； 缺点：产生非均衡生长，个别细胞体积增大。 2）中期阻断法 用秋水仙素等微管抑制剂将细胞阻断在中期。优点是便于观察染色体，缺点是可逆性较差。;第二节 细胞周期调控;prematurely condensed chromosome，PCC;Hartwell 1960s, Nurse 1970s 分别以芽殖酵母和裂殖酵母为材料，利用温度敏感突变株，发现许多与细胞分裂有关的基因( cdc)。;FISSION YEAST ;BUDDING YEAST ;T. Hunt 1980s发现海胆的卵裂过程中两种蛋白质的含量随细胞周期振荡，命名为cyclin A和B，其mRNA能诱导蛙卵成熟。 1988年Lohka将非洲爪蟾的MPF纯化。经鉴定MPF由32KD和45KD两种蛋白组成，是一种丝氨酸/苏氨酸激酶。进一步的研究发现MPF=cdc2+clyclin B;Leland H. Hartwell ;二、CDK;Different CDKs;CDK mouse model;三、细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子;四、细胞周期蛋白cyclin;不同类型的CDK/cyclin复合体;CELL CYCLE REGULATION;中期当MPF活性达到最高时，激活APC，通过泛素化途径降解cyclin B，完成细胞周期。 分裂期周期蛋白N端具有降解盒。 泛素由76个氨基酸组成，高度保守。共价结合泛素的蛋白能被蛋白酶体识别和降解，是细胞内短寿命蛋白和异常蛋白降解的普遍途径。;Destruction Box in Cyclins;Two types unbiqutin ligase;26S蛋白酶体是大型的蛋白酶，可将泛素化的蛋白质分解成短肽。;Sister chromatids separating;Cohesin and condensin;M期CDK的激活起始于分裂期cyclin的积累。 结合cyclin B的CDK1被Wee1将Thr14和Tyr15磷酸化而不具有活性，使CDK/cyclin不断积累。 在M期，Wee1的活性下降，cdc25使CDK去磷酸化，去除了CDK活化的障碍。 CDK的激活需要Thr161的磷酸化，它是在CDK激酶(CDK activating kinase CAK)的作用下完成的。 ;CDK ACTIVATING;六、细胞周期检验点（check point）;FOUR CHECKPOINTS;ATM（ataxia telangiectasia-mutated gene） 最早发现于毛细血管扩张性共济失调症患者，人类中大约有1%的人是ATM缺失的杂合子，表现出对电离辐射敏感和易患癌症。 ATM编码一个蛋白激酶，结合在损伤的DNA上，其信号通路有两条。 ①激活Ch