广西地方标准《罗氏沼虾诺达病毒检测 RT-PCR法》征求意见稿（编制说明）.docVIP

《罗氏沼虾诺达病毒检测RT-PCR法》 编制说明 一、标准的目的和意义 罗氏沼虾是我国最主要的淡水虾养殖品种，但2010年全国的罗氏沼虾闹“苗荒”，苗价急剧攀升，苗种供应不足已经成为制约我国罗氏沼虾养殖业发展的首要因素。罗氏沼虾白尾病（WTD）又称肌肉白浊病、白体病，主要危害罗氏沼虾苗种，尤其是淡化后的仔虾；患病虾苗可在较短时间内大量死亡，虾池中累积死亡率高达30%～90%。该病流行广、发病快、死亡率高，严重制约着罗氏沼虾养殖业的健康发展，已成为罗氏沼虾苗种业和养殖业的主要威胁，被世界动物卫生组织（OIE）列为必须申报的疾病。罗氏沼虾诺达病毒（MrNV）是引起罗氏沼虾WTD的主要病原，但目前国内尚没有检测MrNV的相关标准。广西是我国罗氏沼虾的主要养殖区，急需一种检测MrNV的技术规范来为罗氏沼虾WTD的快速诊断及罗氏沼虾苗种的MrNV检疫提供技术手段。因此，制定MrNV套式RT-PCR检测方法的地方标准，规范MrNV的检测，为广西境内MrNV的检测提供依据和技术手段，对于WTD的诊断、防控以及MrNV的检验检疫都具有重要意义。 项目由广西水产研究所水产品质检中心（广西渔业病害防治环境监测和质量检验中心）实施。中心拥有各种大型仪器设备82台（套），通过了国家和省级计量认证，长期从事水生动物病害方面的检测和研究工作。近几年来，项目组主要成员一直开展MrNV的监测和研究工作，积累了不少经验，并从患WTD的罗氏沼虾中检测出诺达病毒，保存了阳性材料，为MrNV检测标准的制定打下了重要基础。我们承担广西壮族自治区质量技术监督局桂质监函[2011]884号文下达的广西地方标准制定《罗氏沼虾诺达病毒检测 套式RT-PCR法》的任务，高标准地完成标准的制定工作。 二、标准起草工作简况 承担任务后，广西水产研究所成立标准起草小组，由黎小正副所长担任组长，成员有韦信贤、童桂香、吴祥庆。为了使制定的标准具有科学、规范和可操作性，起草小组专门制定了《罗氏沼虾诺达病毒检测 套式RT-PCR法编制工作方案》。 根据工作方案和任务要求，广泛查询和收集资料、开展调查和深入研究。参考国内同类相关国家标准和行业标准的制定情况，充分借鉴、吸收标准规范的成果；采购试剂，探索样品处理及核酸提取的方法，优化套式RT-PCR反应条件和反应程序，确保规范的科学性和可操作性，初步建立MrNV套式RT-PCR检测方法。 对检测方法进行特异性、敏感性、重复性等多方验证，汇总、分析实验数据，进行方法的可行性评价，完成标准征求意见稿，送专家征求意见。标准征求意见稿完成后，分别向在检验检疫、科研、教学、技术推广等方面有实际经验和较高理论水平的专家征求意见。 2012年11月，修改并完成标准送审稿。起草小组成员根据专家的反馈意见，逐一对标准的条款进行修改，对有疑问的条款，再向专家咨询、落实或再翻阅资料查证。在编写的规则上，按照《标准化工作导则》的要求进行，编制出该标准的送审稿。 三、标准确定所遵循的原则 1、政策性原则：本标准编制的每一项内容都遵循国家有关的法律、法规和规章制度。 2、先进性原则：本标准是在国内没有类似标准的前提下提出的，因此制定具有先进性。 3、适用性原则：本标准操作规程容易掌握，适用于检验检疫。 4、协调统一性原则：本标准是以OIE《水生动物疾病诊断手册》（2009年版）作为指导、依据和参考的前提下制定，所以与其操作方法协调统一。 5、规范化原则：本标准的制定按照GB/T 1.1-2001《标准化工作导则 第一部分：标准的结构和编写规则》来编写。 四、标准的主要内容 本标准积极借鉴OIE最新诊断手册，结合广西罗氏沼虾检验检疫需求而制定。编写内容包括适用范围、术语、材料、操作程序、废弃物处理。 五、主要参考文献 1、GB/T 1.1-2001《标准化工作导则 第一部分：标准的结构和编写规则》。 2、OIE《水生动物疾病诊断手册》（2009年版）。 《罗氏沼虾诺达病毒检测 套式RT-PCR法》起草小组 2012年12月