第3章节细胞生物学研究探究方法.pptVIP

第三章 细胞生物学研究方法 1.分辨率(resolusion)：区分两个质点间的最小距离。R=0.61λ/n sinα/2 其中: n=标本和物镜之间介质折射率; λ=入射光线波长； α=镜口角（样品对物镜镜口的张角） nsinα/2称为物镜的数值孔径(numerical aperature, NA) R=0.61λ/NA 思考题：如何提高显微镜的分辨能力？ (七)荧光共振能量转移技 (Fluorescence resonance energy transfer, FRET) 暗视野显微镜 （dark field microscope） 聚光镜中央有挡光片，照明光线不直接进人物镜，只允许被标本反射和衍射的光线进入物镜. 背景黑,物体的边缘亮,增大反差,提高分辨率. 主要观察轮廓,适于观察活细胞内的细胞核、线粒体液体介质中的霉菌等。 （九）当代显微镜的发展趋势  （1）特点： 介质密度均一； 主要根据被分离物质的体积差异； 速度由低向高，逐级离心。 （2）用途：初步分离大小相差悬殊的细胞和细胞器，常需进一步通过密度梯度离心再行分离纯化。 3、密度梯度离心（density gradient centrifugation) 2.动物细胞培养 (5)细胞系（cell line）：能够传代40-50次并且仍保持原来染色体的二倍体数量及接触