荧光化学发光在植物分子生物学的运用.pptVIP

1、荧光技术 FI应用的优势 FI应用－核酸定量分析 2）时间分辨荧光（TRF） 3）荧光偏振（FP） 4）荧光共振能量传递（FRET） 5）均相时间分辨荧光（HTRF） 2、化学发光技术 发光应用－基因调控 BRET应用示例－蛋白质相互作用 技术总结 Tecan多功能酶标仪家族 多功能酶标仪支持的微孔板类型 以GFP为基础的Ca++显示剂（cameleons） 将一个青色荧光蛋白通过钙调蛋白（CaM）和CaM结合肽（M13）连结到一个黄色荧光蛋白上。 Ca＋＋与CaM的结合导致CaM与M13结合，分子构型变化，使两个GFP分子更接近，就会发生荧光共振能 量转移。 化学发光技术的分类 发光 发光共振能量传递 1）发光（Lum） Substrate Product + Light Enzyme 优势：超高灵敏度 Lum应用范围 钙流检测 基因调控 ATP检测 发光免疫分析 发光应用－钙流检测 水母发光蛋白Aequorin Ca++ Kinetics of the β-glucan（葡聚糖）elicitor-induced enhancement of the [Ca2+]cyt in soybean cells. （Biological Procedures Online 2002- 4/1, p105-118） 发光应用示例－钙流检测